低叶绿素b水稻叶片自然衰老过程中光合作用变化以及叶绿体中Calvin循环多酶复合体的纯化

来源 :南京农业大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:shouquanwenjian
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光合作用是植物生长发育的基础,它为植物提供所需的物质和能量。在农业生产中,由于叶片早衰而造成许多作物减产。水稻是我国主要的粮食作物之一,因此延缓衰老,延长光合功能期对于改善光合作用和提高产量有着十分重要的意义。 本研究通过测定水稻低叶绿素b突变体及其野生型(镇恢249)第五叶自然衰老过程中净光合速率(Pn)、叶绿素荧光参数、Rubisco相对含量的变化,研究了低叶绿素b对水稻叶片自然衰老的影响。结果表明,叶片全展后随着衰老进程,突变体与野生型的Pn、叶绿素荧光参数中除qN外以及Rubisco大小亚基相对含量都呈下降趋势,而qN呈上升趋势,低叶绿素b突变体的净光合速率高于野生型且下降慢于野生型,但是二者叶绿素荧光参数之间的差异却很小,而野生型Rubisco相对含量下降较突变体快,因此突变体比野生型Pn高的原因主要在碳同化。 在此基础上进一步研究了水稻低叶绿素b突变体及其野生型第五叶自然衰老过程中光合放氧、Rubisco大亚基含量变化以及对胰蛋白酶敏感性的变化,通过喷施不同的抗氧化剂以及氧化剂研究其对Rubisco大亚基含量变化的影响。结果表明,叶片全展后随着衰老进程,突变体与野生型光合放氧速率、Rubisco大亚基相对含量呈下降趋势,抗氧化剂可以不同程度的缓解Rubisco含量的下降,而氧化剂则加速Rubisco含量的下降。低叶绿素b突变体的光合放氧速率高于野生型,Rubisco大亚基含量下降慢于野生型,并且衰老进程中突变体Rubisco大亚基对胰蛋白酶的敏感性低于野生型,因此活性氧是Rubisco降解的调节剂。 本研究还经过叶绿体提取、(NH4)2SO4分段盐析、分子筛层析和离子交换层析四步纯化后,酶活检测及电泳结果表明纯化得到的蛋白质可能是Calvin循环多酶复合体,分子量约为520kDa和230kDa。
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