胰岛素抵抗大鼠胰岛及HIT-T15细胞氧化应激与自吞噬的研究

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研究目的:观察高脂饲养大鼠胰岛素抵抗时胰岛β细胞是否发生自吞噬现象,并探讨胰岛氧化应激与胰岛β细胞自吞噬的关系。 材料与方法:40只雄性Wistar大鼠,分为单纯高脂和正常饲料组,每组又分为5个亚组,分别代表5个阶段,大鼠喂养至10、14、16、18、20周时分阶段处死。所有动物处死前,禁食14小时,麻醉后尾静脉取血测血糖,并心脏取血分别检测血清或血浆中胰岛素、甘油三酯、胆固醇、FFA等指标,并迅速取出胰腺、肝脏、肾脏(肝脏、肾脏备第二部分用),取部分胰腺组织做冰冻切片及电镜观察,部分分离纯化胰岛,液氮冻存,待标本收齐后,作组织匀浆,采用BCA蛋白定量法,测定组织中蛋白浓度,采用比色法测定胰岛组织匀浆中SOD及MDA的含量。采用MDC(monodansylcadaverine)染色胰腺组织冰冻切片,并进行激光共聚焦显微镜荧光定量以及透射电镜直接观察自吞噬泡来观察胰岛自吞噬现象的发生。所有标本结果以均数±标准差表示。每一个亚组均与同期对照比较并进行亚组间比较作统计分析。 发现:1.高脂饲养大鼠在饲养10周以后体重明显高于正常,腹型肥胖形成(VF/W值3.9±0.15 vs.2.4±0.1,p<0.05),同时伴有高胰岛素血症(1.05±0.18 vs.0.52±0.02,p<0.05)、高甘油三酯(1.37±0.22 vs.0.66
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