猪瘟(Classical Swine Fever, CSF)，是危害我国养猪业的最重要的一种高度接触性烈性传染病之一，多年来被列为我国猪病防治研究的首要对象之一。世界上各国都采取了许多措施较好地控制了猪瘟的大规模爆发流行，但自上世纪70年代末以来，猪瘟的流行与发病特点发生了很大的变化，近年来我国猪瘟的发生又呈上升趋势，临床表现更为复杂，而且免疫猪群发生猪瘟越来越多。　　 根据猪瘟病毒中国C株的全基因组序列，分别设计扩增该病毒主要结构蛋白基因E0全长的相应引物，利用RT-PCR技术对目的基因进行了扩增，获得了714bp的基因片段。再将目的基因与pET-28a载体连接，构建高效表达重组载体pET28a-C-E0。转化大肠杆菌BL21(DE3)，重组子经酶切和测序鉴定正确后进行诱导表达。IPTG诱导表达后进行SDS-PAGE电泳检测。结果表明融合蛋白在37℃下，1.0 mmol/L的IPTG浓度诱导下能良好表达，并且，融合蛋白均以包涵体的形式存在。用镍柱纯化包涵体后能获得较纯的融合蛋白。　　 用纯化的E0抗原免疫BALB/c小鼠，制备脾细胞，与SP2/0骨髓瘤细胞系融合，获得2株能稳定分泌抗CSFV E0蛋白的单克隆抗体杂交瘤细胞株，分别命名为E01，和E02，抗体亚类为IgG2bκ，诱生腹水的抗体效价分别为1∶128000、1∶256000。间接ELISA检测特异性表明，2株单克隆抗体与其他2种猪类病毒无交叉反应。本实验为进一步研制CSFV中和单抗治疗剂和快速检测试剂盒奠定了基础。　　 采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒，标记纯化的抗CSFV E0单克隆抗体E01作为捕捉抗体，将纯化的抗CSFV E0单克隆抗体E02和羊抗鼠IgG包被在硝酸纤维素膜(NC)上，分别作为检测线和质控线，优化反应条件，组装成胶体金免疫层析试纸条。结果表明阴性对照检测结果成立，检测粗提的CSFV，质控线明显显色，检测线显色较淡。