论文部分内容阅读
目的:建立兔腹主动脉粥样硬化DES置入模型,研究化痰活血解毒方对兔腹主动脉DES置入后新生动脉粥样硬化斑块的影响。方法:1、建立兔腹主动脉粥样硬化DES置入模型及实验分组:选取雄性日本大耳白兔(清洁级)40只预适应饲养1W后进行腹主动脉球囊损伤,高脂饲料(基础饲料中加入胆固醇5%,猪油5%,蛋黄粉3%)喂养8W,于腹主动脉最狭窄处置入DES支架,随机分为4组:模型组(MG组),瑞舒伐他汀组(RG组),化痰活血解毒方低剂量组(LG组),化痰活血解毒方高剂量组(HG组)。其中化痰活血解毒方药物组成为:瓜蒌皮15g,薤白18g,皂角刺15g,血竭2g,红曲25g,三七5g,忍冬藤25g,以上七味中药,其中红曲、血竭、三七碎成细粉状;瓜蒌、皂角刺、忍冬藤、薤白加水反复煎三次,后浓缩为浸膏,然后加入上述细粉,真空干燥,粉碎,即得中药,经灌胃途径给药。各组给予相应药物干预24周。2、利用ELISA法检测不同药物干预24周后各组血清CRP、IL-6、MMP-9的表达水平。3、运用OCT扫描成像技术观察支架置入后支架段血管内膜的情况:药物干预24周后评价各组支架处血管管腔面积、新生内膜厚度、新生内膜面积等指标。4、通过免疫组织化学法检测各组血管的平滑肌肌动蛋白(a-Actin)、平滑肌骨桥蛋白(OPN)、巨噬细胞CD68的表达。结果:1、动物模型:高脂饲料喂养后实验兔体重均有所增加,后期体重基本不变。腹主动脉球囊损伤后兔子共死亡4只,死亡原因考虑为应激性损伤等。DES支架置入前行腹主动脉造影显示血管狭窄程度约为30~80%。手术后3天内小部分实验兔出现精神淡漠,食欲不振的情况,3天后基本好转;余实验兔术后恢复良好,正常饮食。模型组兔子在DES置入术后立即死亡1只,猜测其死亡原因可能为血管应激性痉挛等;化痰活血解毒方低剂量组兔子死亡2只,一只DES置入后即刻死亡,另一只于术后3天内死亡,化痰活血解毒方组死亡一只,其死亡原因为术后手术伤口持续出血,考虑因缝合包扎手术创口时缝合线未结扎紧密有关。余各组实验兔状态良好,直至实验结束。兔腹主动脉血管造影提示血管畅通,血流正常,支架贴壁良好。药物干预过程中各实验兔精神状态良好,毛发正常有光泽,进食、二便等未见明显异常,未见明显药物不良反应。2、血清炎症因子:与MG组相比,RG组、LG组与HG组CRP、IL-6的表达水平均低于MG组(P<0.05);与RG组相比,LG组血清中CRP、IL-6的表达明显低于RG组(P<0.05),HG组的表达无明显统计学意义(P>0.05);与LG组相比,HG组表达水平明显较高(P<0.05)。血清中MMP9的表达水平结果显示:与MG组相比,RG组、LG组与HG组表达水平明显低于MG组(P<0.05);与RG组相比,LG组的表达明显低于RG组(P<0.05),HG组的表达稍高于RG组,但无明显统计学意义(P>0.05);与LG组相比,HG组的表达高于LG组(P<0.05)。3、OCT扫描:经定量分析后结果显示:与MG组相比,RG组、LG组、HG组的管腔面积均比MG组均大,LG组的管腔面积明显较大(P<0.05),RG组、HG组与MG组之间差异无明显的统计学差异(P>0.05);与RG组相比,LG组、HG组管腔面积无明显差异(P>0.05);与LG组相比,HG组无明显统计学意义(P>0.05)。与MG组相比,RG组、LG组、HG组的新生内膜面积及新生内膜厚度均低于MG组,其中LG组的新生内膜面积显著降低(P<0.05);与LG组相比,RG组、HG组的新生内膜面积无明显统计学意义(P>0.05)。4、免疫组化染色:各组兔腹主动脉支架段血管a-Actin免疫组化定量分析后结果显示:与MG组相比,RG组a-Actin的阳性表达稍高于RG组,但无统计学意义(P>0.05);LG组a-Actin的阳性表达明显高于RG组(P<0.05),HG组a-Actin的阳性表达与RG组无明显统计学意义(P>0.05);LG组a-Actin的阳性表达稍高于RG组,HG组a-Actin的阳性表达稍低于RG组,但两者与与RG组相比均无统计学意义;HG组与LG组相比有统计学意义(P<0.05)。各组兔腹主动脉支架段血管OPN、CD68免疫组化定量分析后结果显示:RG组、LG组、HG组OPN、CD68的阳性表达均显著低于MG组,有明显的统计学意义(P<0.05);LG组、HG组OPN、CD68的阳性表达与RG组相比无明显统计学意义(P>0.05);RG组与HG组相比OPN、CD68的阳性表达无明显统计学意义(P>0.05)。结论:1、化痰活血解毒方可降低DES置入后血清炎症因子CRP、IL-6、MMP9的表达水平,具有抑制炎症反应的作用,可抑制支架内新生动脉粥样硬化的形成。2、化痰活血解毒方可抑制VSMC的表型转化,抑制内膜增殖及迁移;抑制巨噬细胞CD68的过表达,具有抗支架内新生动脉粥样硬化斑块的作用。