ATP生物发光法中ATP提取剂的研究

来源 :华东师范大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:to_3000
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
ATP-生物发光法是一种用于分析待检测样品中有无微生物及其数量的方法。自20世纪40年代末期虫萤光素-萤光素酶体系在萤火虫中被发现并被用于检测ATP含量,该方法已逐渐成为精确测量ATP水平及检验微生物的快速方法。随着食品生产的危害分析与关键控制点(HACCP)制度的普遍实行,迫切需要一种快速简便的微生物检测方法满足市场需求,因此提高该方法的检测灵敏度、改进检测方法并扩大检测应用范围,成为目前研究比较活跃的领域,为了使虫萤光素酶检测方法达到广泛的应用,十分有必要选择合适的ATP提取剂及其提取方法以使该方法更趋方便、完善。本文作为ATP提取剂的初步研究,主要内容包括:阳离子季铵盐类ATP提取剂的选择及提取方法的确定,阳离子季铵盐类ATP提取剂提取环境的构建,阳离子季铵盐类ATP提取剂提取细菌ATP机理的初步探索,ATP生物发光法与传统微生物检测方法在实际应用中的比较。上述工作将为ATP生物发光试剂盒产品的开发及ATP生物发光法在食品及环境领域的广泛应用提供了良好的基础。通过对细菌ATP提取效果的比较,获得了如下结果:确定了季铵盐阳离子表面活性剂类ATP提取剂的浓度为0.05%,提取时间为3min;并确定了ATP提取剂复配的最佳条件:pH值5.2,Cu2+浓度为0.1-0.5μg/mL,DEAE的浓度为0.05%,PHMG与BAB复配的最佳浓度为1%、时间为3min;另外,为配合ATP提取剂工作,缓冲体系中小牛血清白蛋白(BSA)及EDTA的浓度分别确定为0.04%-0.06%和0.4mM。大肠杆菌和金黄葡萄球菌被季铵盐阳离子表面活性剂类ATP提取剂处理后,其数量、超微形态结构及260nm紫外吸收物均发生变化,表明了季铵盐阳离子类ATP提取剂作用于细胞外部结构并进而改变细胞通透性;对本研究采用的ATP提取剂与其它两种市售的ATP提取剂的高效液相色谱图进行了比较分析,由出峰时间的不同判断本论文中研究的季铵盐阳离子表面活性剂类ATP提取剂与其它提取剂成分不同,具有创新性。对利用ATP生物发光法检测环境空气、肉类食品及流质牛奶饮品的微生物的具体方法进行摸索,并与传统的平板计数法进行比较,相关性可达到0.95,从而为该方法的实际应用奠定了基础。
其他文献
<正>腰椎管狭窄症是临床常见的脊柱退行性疾病,老年患者常伴有骨质疏松,后者在一定程度上加重了退变的发展,引起小关节增生内聚,造成中央管和神经根管的狭窄。患者病程长,症
随着社会经济迅速发展,酒泉市动物及动物产品流通日益频繁,动物产地检疫极为重要。本文主要论述了酒泉市动物产地检疫的作用、意义、现状、存在的问题及解决对策和措施。
根据2005-2015年新安江流域生态与经济的相关数据,建立跨省份的新安江流域生态补偿标准的核算模型,依据综合成本法核算生态保护者的总成本;对流域生态系统服务价值进行敏感性
一系列的研究表明在成人骨髓中有多种分化潜能的干细胞,它们展示了巨大的功能可塑性,可在新的微环境中生成新的组织所必需的细胞株.这种现象对心肌的生理有巨大的影响,科学家
本文为中国女企业家协会、中国企业家调查系统、卓越企业家成长研究基金联合课题组2017年共同完成的首次全国范围大规模女企业家问卷调查报告,共回收有效问卷2505份,样本覆盖
患者,男,36岁.自服农药甲胺磷,于2001于12月15日4时急诊入院.该患者不省人事,呈潮式呼吸、烦躁、双瞳孔等圆等大,对光反射迟钝,T36℃,P100次/min,R 46次/min,BP 140/80 mmHg.
目前湖南省果蔬农产品分散的物流运作模式不仅增加了果蔬农产品的流通损耗,而且降低了物流运作效率,提高了物流成本。从长远发展来看,湖南省果蔬农产品物流必须构建一体化物
第三方物流企业是联系生产、流通和消费的一类服务业,是关联企业优化经济资源配置,提高企业运营质量,改善资本环境以及形成企业核心竞争力的重要途径。作为一个新兴产业,它的
为了探讨赣南产区纽荷尔脐橙果园叶片营养状况与果实品质的相互关系,测定了9个县(市、区)58个脐橙园叶片的矿质营养元素、果实可溶性固形物(TSS)、可滴定性酸(TA)含量和单果
科研数据开放共享已成为国际科研资助机构的共同要求,相应的技术条件已经基本具备,但事实上在很大程度上仍处于"都喜欢但很少做"状态。作者利用新制度经济学原理,从复杂环境