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目的：胰腺癌是一种常见的恶性消化道肿瘤，病情隐匿，且快速发展，在疾病早期难以得到确诊。胰腺癌恶性程度高，其五年生存率不到6%，因此只有早期诊断，才有望得到较好的治疗效果。然而，现有的胰腺癌肿瘤标记物尚不能满足临床需求，寻找理想的用于早期诊断或判断预后的胰腺肿瘤标志物，具有非常重要的意义。其次，外科手术是现有治疗胰腺癌的一种有效方法，对其进行根治性切除手术有可能达到治愈效果，改善胰腺癌的预后。胰腺癌的早期诊断不仅可以提高预后，还可以为术前可切除性评估提供可靠参考。研究表明：人血清中的蛋白质成份会在疾病早期阶段有一定变化，分析血清蛋白成份变化对寻找相关疾病的生物标识物有较大帮助，本研究应用蛋白组学相关方法对16例胰腺癌患者、16例良性胰腺疾病患者和16正常健康人的外周血进行检测分析，筛选并鉴定可能存在的胰腺癌血清中特异的早期诊断标记物。方法：同位素标记相对和绝对量技术（isobaric tags for relative and absolute quantitation，iTRAQ）是目前应用非常广泛的蛋白质组相对定量方法，基于iTRAQ技术的蛋白质组学研究具有样品要求量低、灵敏度和准确度高、可观察蛋白质动态变化的显著优点。使用核素标记相对和绝对定量（iTRAQ）技术结合纳升级反相液相色谱-串联质谱法（nanoflow Reversed-phase Liquid Chromatography-tandem MassSpectrometry, nanoRPLC-MS/MS），对2012年3月-2013年11月入院的16例胰腺癌患者、16例良性胰腺疾病患者（包括：慢性胰腺炎8例，胰腺浆液性囊腺瘤2例，胰腺粘液性囊腺瘤1例，胰腺假性囊肿3例，急性胰腺炎治疗后2例）和16例正常健康人的血清进行差异蛋白组学分析，筛选特异性的血清肿瘤标志物。结果：通过比较分析胰腺癌组，胰腺良性疾病组，正常健康人组的血清，质谱鉴定结果显示，胰腺癌和胰腺良性对照组中共筛选和鉴定出469种蛋白，其中45个差异表达的蛋白，有19种蛋白在胰腺癌组较良性胰腺疾病组表达升高，降低的蛋白有26种；胰腺良性疾病同正常对照组中共筛选和鉴定出473种蛋白，其中有差异表达的蛋白46种，胰腺良性疾病较正常升高的蛋白有25种，降低的蛋白有21种。同胰腺良性疾病组比较，我们筛选并成功鉴定出17种差异蛋白，分别为Seprease、α-1B糖蛋白（Alpha-1B-glycoprotein）、角蛋白I型细胞骨架14（Keratin, typeI cytoskeletal14）、Ficolin-3、过氧化氢酶（Catalase）、基膜聚糖（Lumican）、聚免疫球蛋白受体（Polymeric immunoglobulin receptor， PIGR）、载脂蛋白A-II（ApolipoproteinA-II，ApoA-II）、血清淀粉样蛋白A-4蛋白（Serumamyloid A-4protein，SAA4）、血小板活化因子乙酰水解酶（Platelet-activatingfactor acetylhydrolase，PAFA）、巨噬细胞集落刺激因子1受体（Macrophagecolony-stimulating factor1receptor，MCSFR-1）、胰岛素样生长因子结合蛋白-2（Insulin-like growth factor-binding protein-2，IGFBP-2）、腱生蛋白-X(Tenascin-X)、α-2-HS-糖蛋白、组织蛋白酶D（Cathepsin D）、泛酰巯基乙胺酶（Pantetheinase）。其中有6种在胰腺癌组表达显著降低，其差异具有统计学意义（p＜0.05），分别为Seprease、 α-1B糖蛋白（Alpha-1B-glycoprotein）、角蛋白I型细胞骨架14（Keratin, type Icytoskeletal14）、Ficolin-3、过氧化氢酶（Catalase）、基膜聚糖（Lumican），但上述6种蛋白在胰腺良性疾病组却呈高表达；11种在胰腺癌组血清中高表达，分别是聚免疫球蛋白受体（Polymeric immunoglobulin receptor，PIGR）、载脂蛋白A-II （Apolipoprotein A-II，ApoA-II）、血清淀粉样蛋白A-4蛋白（Serum amyloid A-4protein，SAA4）、血小板活化因子乙酰水解酶（Platelet-activating factor acetylhydrolase,PAFA）、巨噬细胞集落刺激因子1受体（Macrophage colony-stimulating factor1receptor，MCSFR-1）、胰岛素样生长因子结合蛋白-2（Insulin-like growth factor-binding protein-2，IGFBP-2）、腱生蛋白-X（Tenascin-X）、α-2-HS-糖蛋白、组织蛋白酶D（Cathepsin D）、泛酰巯基乙胺酶（Pantetheinase）。分析胰腺癌患者组、良性胰腺疾病患者组和正常健康人群组血清中筛选出的蛋白，我们发现：IGFBP-2、腱生蛋白-X、AHSG、PIGR、ApoA-II、SAA4和Cathepsin D，上述7种蛋白表达在胰腺癌组的患者血清中显著升高，但在胰腺良性疾病组和正常健康人组中呈低表达，其差异具有统计学意义（p＜0.05）。结论：同正常健康人以及胰腺良性疾病的患者的血清比较，胰腺癌组的患者血清中存在较多表达差异的蛋白，利用iTRAQ技术结合nanoRPLC-MS/MS法可较好筛选并鉴定出与胰腺癌发生发展相关的血清肿瘤标志物。