【摘 要】
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目的 探讨黄芪、当归、忍冬藤水提物调控大鼠T淋巴细胞分化及其相关炎性因子表达、恢复T细胞免疫应答网络的动态平衡,抑制大鼠滑膜细胞炎性增殖的作用机制,为中医药防治类风湿关节炎提供新的思路,并为传统中医学理论中医“气、血、毒”为代表的病因病机理论的现代化研究提供新的思维、方法以及途径。方法 Transwell建立大鼠滑膜细胞株RSC-364细胞与大鼠外周血淋巴细胞共培养体系,IL-1β诱导细胞成炎性损
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目的 探讨黄芪、当归、忍冬藤水提物调控大鼠T淋巴细胞分化及其相关炎性因子表达、恢复T细胞免疫应答网络的动态平衡,抑制大鼠滑膜细胞炎性增殖的作用机制,为中医药防治类风湿关节炎提供新的思路,并为传统中医学理论中医“气、血、毒”为代表的病因病机理论的现代化研究提供新的思维、方法以及途径。方法 Transwell建立大鼠滑膜细胞株RSC-364细胞与大鼠外周血淋巴细胞共培养体系,IL-1β诱导细胞成炎性损伤模型,以“益气活血解毒法”代表性药物黄芪、当归、忍冬藤水提物冻干粉作为干预措施,IL-1β抑制剂作为阳性对照;HE染色及流式细胞术检测共培养体系下滑膜细胞形态以及凋亡率的变化,探讨黄芪、当归、忍冬藤水提物冻干粉对滑膜细胞炎性增殖的调控作用;RTCA实时动态细胞仪检测黄芪、当归、忍冬藤水提物冻干粉调控T淋巴细胞亚群迁移的变化,流式细胞仪检测黄芪、当归、忍冬藤水提物干预共培养体系中CD3+CD4+T细胞以及CD3+CD8+T细胞含量变化;ELISA检测黄芪、当归、忍冬藤水提物冻干粉干预培养液上清中CCL2表达的变化。结果黄芪、当归、忍冬藤水提物冻干粉干预后,HE染色结果显示:正常组滑膜细胞多呈长梭形,细胞核大且呈扁圆形,甚至有多层重叠样生长;与正常组相比,模型组滑膜细胞形态发生改变,数量增多;同模型组相比,黄芪组、当归组及忍冬藤组滑膜细胞数量和形态改变,呈多边形,并可出现不同程度的损伤;流式细胞术结果显示:在黄芪、当归、忍冬藤水提物冻干粉干预下,同正常组相比,模型组滑膜细胞凋亡率显著下降（P<0.05）;同模型组相比,黄芪组、当归组及忍冬藤组滑膜细胞凋亡率显著上升（P<0.05）;实验结果显示:在黄芪、当归、忍冬藤水提物冻干粉干预后,同正常组相比,模型组CD3+CD4+T细胞、CD3+CD8+T细胞显著升高（P<0.05）;同模型组相比,在100μg/mL药物浓度作用24 h下黄芪、当归、忍冬藤三组的CD3+CD4+T细胞与CD3+CD8+T细胞迁移量降低（P<0.05）,在250 μg/mL药物浓度作用48 h下,黄芪、当归、忍冬藤三组的CD3+CD8+T细胞迁移量显著降低（P<0.05）。ELISA检测结果显示:在黄芪、当归、忍冬藤水提物冻干粉干预下,同正常组比较,模型组CCL2表达显著性升高（P<0.05）;同模型组相比,黄芪、当归、忍冬藤各组在100 μg/mL、250 μg/mL浓度分别干预24h、48h后,CCL2表达呈显著性降低（P<0.05）。结论黄芪、当归、忍冬藤水提物冻干粉通过调控T细胞免疫平衡网络、调节免疫微环境中T细胞迁移浸润,降低CCL2的表达,来达到抑制大鼠滑膜细胞的炎性增的作用作用。
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