背景血脂代谢紊乱严重影响中国人健康。高低密度脂蛋白胆固醇血症(LDL-C)是动脉粥样硬化性疾病的主要危险因素。此外,低高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)在中国人群中也十分常见。已经证实,低HDL-C血症是动脉粥样硬化性疾病发生、发展的独立危险因素。先前我们通过miRNA芯片筛查发现microRNA-638(miR-638)与HDL-C水平相关,人群中miR-638的表达在低HDL-C人群较HDL-C正常人群表达高。通过生物信息学靶点预测(http://www.targetscan.org/),发现miR-638有潜在与血脂代谢有关的靶基因Steroidogenic acute regulatory protein-related lipid transfer domain 10(StarD10)。目的动物体内实验探讨StarD10与HDL代谢的关系；探讨StarD10对动脉粥样硬化斑块的影响；探讨StarD10对胆固醇逆向转运的影响；探讨社区人群血脂水平与动脉僵硬度关系的随访研究。方法第一部分：一、①构建腺病毒介导StarD10基因过表达载体；②构建腺病毒介导StarD10沉默载体；③StarD10过表达小鼠模型的建立：模式动物随机分组,尾静脉注射腺病毒StarD10过表达载体、StarD10沉默载体、腺病毒空载体及PBS缓冲液(每周2次×1周,每周1次×3周,共计4周)。二、①模式动物血浆TG、TC、 HDL-C. LDL-C浓度测定;②StarD10对小鼠胆固醇逆向转运的影响：通过测定小鼠血清、肝脏及粪便中3H-胆固醇占经腹腔注射3H-胆固醇总量的百分比,评估活体胆固醇逆向转运；③收集小鼠肝脏标本,观察StarD10对肝脏脂代谢相关蛋白表达的影响：提取蛋白质,Western-blot检测相关蛋白水平的变化；④收集小鼠主动脉标本,观察StarD10基因过表达载体对动脉粥样硬化程度与性质的影响：选取代表性主动脉窦截面,H-E染色,定量测定StarD10表达载体干预前后动脉粥样硬化斑块的面积；油红O染色测量脂质沉积情况；免疫组化染色观察斑块稳定性指标：CD68+巨噬细胞分布。第二部分：本课题选取北京地区苹果园社区人群,初次调查时间为2007年9月至2009年1月,共计1680受试者参加,平均年龄为61.30±11.4。2013年2月至9月完成第一次随访调查,共计1499例受试者参加随访(随访率89.2%),平均随访时间为4.8年,其中死亡人数52人。单变量分析：基线血脂水平及随访cf-PWV或cr-PWV相关性。多元线性回归分析：基线血脂水平及随访cf-PWV或cr-PWV相关性(因变量为：cf-PWV或cr-PWV;自变量为：年龄、性别、是否吸烟、是否有高血压病、糖尿病、SBP、DBP、BMI、腰臀围比、TC、TG、HDL-C、LDL-C、 eGFR、空腹血糖及餐后2h血糖)。结果第一部分：一、①经复核腺病毒包装StarD10过表达载体滴度约为1×1010PFU/ml。②经复核腺病毒包装StarD10沉默载体滴度约为1×1010PFU/ml。③在28周的高脂高胆固醇喂养及StarD10干预后,StarD10过表达组小鼠与基线组、PBS对照组、腺病毒对照组相比较,体重及肝脏重量未表现出明显统计学差异,P>0.05;StarD10沉默组小鼠与基线、PBS、腺病毒对照组相比较,体重及肝脏重量未表现出统计学差异,P>0.05。PBS对照组、腺病毒对照组、StarD10过表达组及StarD10沉默组小鼠肝脏StarD10蛋白在肝脏组织的表达量分别为(0.8693±0.02)、(0.8344±0.03)、(1.2055±0.04)、(0.5215±0.04)。StarD10过表达组StarD10蛋白表达明显高于PBS组、腺病毒对照组,P<0.01, StarD10沉默组StarD10蛋白表达明显低于PBS组、腺病毒对照组,P<0.01。二、①尾静脉注射腺病毒包装StarD10载体4周后,小鼠的血脂发生了明显的变化。与基线组、PBS对照组、腺病毒对照组相比,StarD10过表达组小鼠血浆TC、LDL-C略下降,HDL3-C/HDL-C比例升高.②与腺病毒对照组相比,StarD10过表达组血清3H-胆固醇的含量在48h升高了62.86%(P<0.01),StarD10过表达组小鼠肝脏中剩余的3H-胆固醇的含量升高了30.73%(P<0.01)；两天中粪便排除的3H-胆固醇升高了52.72%(P<0.01)。StarD10沉默组胆固醇逆向转运水平较腺病毒对照组无明显统计学差异。③StarD10过表达组小鼠肝脏ABCA1、ABCG1蛋白表达升高.④StarD10过表达组小鼠斑块面积占管腔面积比值略低于腺病毒对照组,但无统计学差异,P>0.05。StarD10过表达组小鼠较腺病毒对照组小鼠斑块内脂质含量明显降低(P<0.01),斑块内巨噬细胞含量较病毒对照组明显降低(P<0.01)。第二部分：①单变量分析的结果表明,TG (r=0.093, P<0.001)与cf-PWV水平呈正相关、HDL-C(r=-0.090,P<0.001)与cf-PWV呈负相关。多元线性回归分析结果显示基线TG(β=0.672.P<0.001)与cf-PWV呈显著正相关,基线HDL-C与随访cf-PWV之间不存在线性相关。②按照男性、女性分类分别计算受试人群基线血脂水平和随访PWV的相关性,结果显示对于女性受试者而言,基线HDL-C与随访cf-PWV呈负相关(β=-0.847,P=0.035),男性受试者基线HDL-C与cf-PWV之间成正相关(β=2.263,P=0.001)。结论1.腺病毒纪装StarD10过表达载体及StarD10沉默载体可转染LDLr-/-小鼠肝脏;2.StarD10过表达为小鼠脂代谢的有利因素,可以通过ABCA1、ABCG1等途径促进胆固醇逆向转运,升高HDL3-L/HDL比例,并能改善小鼠主动脉斑块内脂质含量、降低斑块内炎症。3.社区人群女性受试者HDL-C水平与cf-PWV呈负相关,男性受试者HDL-C与cf-PWV呈正相关性。HDL-C对男性、女性受试者抗动脉僵硬度表现出不一致性,原因可能与HDL-C功能受损有关.男女受试者血脂水平也表现出差异,女性受试者HDL-C水平较男性受试者升高,这可能与雌激素的保护作用相关。