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弓形虫病是由刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)引起的一种人兽共患寄生虫病。本研究应用特异PCR诊断方法检测疑似猪弓形虫病的临床病料组织,并将确诊的临床病料组织用于猪源弓形虫虫株的分离。本研究采用最常用的虫株分离方法,即小鼠接种试验法分离病料中的虫株。结果分离得到PYS株和ZCS株猪源弓形虫分离株。’本研究应用小鼠实验弓形虫病模型筛选治疗猪弓形虫病的有效药物,并将筛选出的药物用于人工感染猪弓形虫病的治疗,同时探讨用于筛选猪弓形虫病治疗药物的动物模型。
在参考国际标准株RH株感染剂量的基础上,本研究以10<3>个PYS株速殖子/只小鼠的剂量腹腔注射小鼠,用于弓形虫治疗药物的筛选。单方药物筛选试验结果为:药物组三(盐酸林可霉素注射液)、组五(阿奇氟注射液)、组九(青蒿)、组十(苦参)抗弓形虫无效;组七(乙胺嘧啶)有一定的抗弓形虫效果,但小鼠存活率低;药物组一(磺胺嘧啶钠注射液)、组二(复方磺胺甲噁唑)、组四(磺胺间甲氧嘧啶钠注射液)、组六(乙酰螺旋霉素)、组八(罗红霉素)有较好的抗弓形虫效果,其中组四(磺胺间甲氧嘧啶钠注射液)与组八(罗红霉素)能彻底清除组织中的弓形虫。
将试验一筛选出的药物进行组方,组方药物试验筛选结果为:5个组方药物组一(磺胺间甲氧嘧啶500mg/kg·d+乙胺嘧啶25mg/kg·d),组二(磺胺间甲氧嘧啶500mg/kg·d+TMP100mg/kg·d),组三(磺胺间甲氧嘧啶500mg/kg·d+乙胺嘧啶25mg/kg.d+‘TMPl00mg/kg·d),组四(复方磺胺甲噁唑500mg/kg·d+罗红霉素200mg/kg·d),组五(复方磺胺甲噁唑500mg/kg·d+乙酰螺旋霉素200mg/kg·d)均能有效治疗小鼠实验弓形虫病;结合腹水虫体计数结果及PCR 检测结果,组方药物组三与组五比其它药物组具有更好的抗弓形虫效果。
在以上研究基础上,本研究以1000万个PYS株弓形虫速殖子/头猪的剂量腹腔注射实验猪,并将组方(磺胺间甲氧嘧啶50mg/kg·d+乙胺嘧啶2.5mg/kg·d+TMP10mg/kg·d)和组方(复方磺胺甲嗯唑50mg/kg·d+乙酰螺旋霉素20mg/kg·d)用于人工感染猪弓形虫病的治疗。结果表明,两个组方均能有效治疗人工感染猪弓形虫病;PCR检测结果显示,试验观察结束时药物组的样品均未扩增出约250bp的弓形虫特异条带,表明药物能彻底清除组织中的虫体。此结果与小鼠实验弓形虫病的治疗效果相一致,初步证明用小鼠实验弓形虫病模型评价治疗猪弓形虫病药物的疗效是一种较为可取的方法。