甘蓝型油菜突变体Cr3529抑制性反向消减文库的构建和BnCr4基因全长cDNA的克隆

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为了探究黄化性状突变的分子机理,本实验应用抑制性消减杂交(suppression subtractive hybridization,SSH)技术构建了甘蓝型油菜幼叶黄化突变体Cr3529的抑制性反向消减文库。经菌落PCR检测,反向消减文库的有效重组率为76.5%,其中插入的cDNA片段大小在100bp到1000bp之间。再通过斑点杂交对100个随机挑选的含有插入片段的阳性克隆进行初步地差异筛选,得到差异比较明显的克隆的比率为75%。随机选取36个阳性克隆进行序列测定。用DNAssist序列分析软件
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