基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases，MMP)是一组在结构上具有极大的同源性，能降解细胞外基质(extracellular matrix，ECM)蛋白的内肽酶总称，因含有金属离子锌钙而得名。金属蛋白酶组织抑制剂(tissue inhibitor of matrix metalloproteinases，TIMP)是MMP内源性特异性抑制因子，TIMP以1∶1的比例与MMP形成MMP-TIMP复合物，阻断MMP与底物的结合，也可与酶原结合阻止其活化。MMP-TIMP是参与ECM降解与重建的主要蛋白酶系统，它参与了机体多种生理及病理过程，包括组织的修复与重建、细胞的迁移、血管的形成、炎症反应、免疫应答以及肿瘤的侵袭与转移。基质金属蛋白酶-3(matrix metalloproteinase-3，MMP-3)及基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9，MMP-9)是基质金属蛋白酶家族的重要成员，MMP-3又称基质溶解素-1(stromelysin-1)，主要降解蛋白聚糖的核心蛋白、纤维连接蛋白、弹性蛋白、层粘蛋白、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ型胶原等。MMP-9又称明胶酶B(gelatinase B)，主要降解Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ、Ⅺ型胶原、明胶、纤维连接蛋白、弹性蛋白、层粘蛋白、粘连蛋白等。TIMP-1是MMP-3及MMP-9的主要抑制剂。系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus，SLE)是一种病因未明的自身免疫性炎症性结缔组织病，表现为体内产生大量的自身抗体，受累脏器出现免疫复合物沉积及各种白细胞浸润，引起一系列炎症反应，并最终导致多系统多脏器损害。在SLE发病机制中炎症细胞浸润、血管炎性损害、细胞外基质代谢紊乱与异常沉积是重要环节，推测MMP-3、MMP-9及TIMP-1在SLE的病理生理中发挥作用。目前在SLE血清MMP-3及MMP-9水平的报道较少见，为进一步了解MMP-3、MMP-9及TIMP-1在SLE发病机制中的作用，我们检测了45例SLE患者血清MMP-3、MMP-9及TIMP-1水平，并探讨其临床意义。材料和方法1．研究对象共搜集郑州大学一附院皮肤科门诊及病房资料完整的SLE患者45例，均符合1997年美国风湿协会修订的SLE诊断标准，其中女41例，男4例；年龄9-64岁，平均年龄(28.41±11.32)岁，病程2天-12年，平均(31.7±46.8)月，其中10例SLE活动组患者经正规皮质类固醇激素治疗(剂量相当于泼尼松30-80mg／d)，病情稳定一个月后再次留取血清标本。正常对照组30例为健康体检者，其中女27例，男3例，年龄20-43岁，平均(26.95±10.63)岁，两组在性别及年龄构成上差异无显著性。根据SLE疾病活动指数(SLEDAI)对SLE患者疾病活动程度进行评分，参照郑敏等标准判断是否为疾病活动期。根据尿蛋白(++以上或＞0.5g／d或尿有颗粒管型)将SLE分为肾损害组及非肾损害组。2．实验方法血清MMP-3、MMP-9及TIMP-1的检测：MMP-3、MMP-9及TIMP-1试剂盒购自上海森雄科技实业有限工司(Catalog No∶SX01105；SX01108；SX01148)，采取双抗体夹心酶联免疫吸附测定法(ELISA)，严格按照说明书步骤进行操作。3．统计方法所有数据均用SPSS11.0统计软件处理，血清MMP-3、MMP-9及TIMP-1含量均为偏态计量资料，用中位数及四分位数(25％，75％)表示，组间比较采用Mann-Whitney U检验，治疗前后采用Wilcoxon检验，相关分析采用Spearman相关分析方法，显著性水平α=0.05。一、SLE患者组与正常对照组血清MMP-3、MMP-9及TIMP-1水平比较及相关性分析1．SLE患者血清MMP-3水平明显升高(P＜0.01)，MMP-9水平明显降低(P＜0.01)，TIMP-1水平两组差异无显著性(P＞0.05)。2．相关性分析表明，SLE患者组血清MMP-3、MMP-9分别与TIMP-1无明显相关性(r分别为-0.065；0.117 P＞0.05)，MMP-3与MMP-9呈负相关(r=-0.687P＜0.01)，正常对照组MMP-3、MMP-9分别与TIMP-1无明显相关性(r分别为-0.092；0.436 P＞0.05)，MMP-3与MMP-9无明显相关性(r=-0.196 P＞0.05)。二、血清MMP-3、MMP-9、TIMP-1与SLE疾病活动性的关系及相关性分析1．SLE活动期患者血清MMP-3水平明显高于非活动期(P＜0.05)，MMP-9明显低于非活动期(P＜0.05)，TIMP-1水平活动组与非活动组比较差异无显著性(P＞0.05)。2．相关性分析显示，SLE患者血清MMP-3水平与SLEDAI呈正相关(r=0.845P＜0.01)，MMP-9与SLEDAI呈负相关(r=-0.676 P＜0.01)，TIMP-1与SLEDAI无明显相关性(r=0.098 P＞0.05)。三、不同临床特点SLE患者血清MMP-3、MMP-9、TIMP-1水平比较肾损害组及肺炎组血清MMP-3水平高于非肾损害组及非肺炎组(P＜0.01)，而血清MMP-9明显低于非肾损害组及非肺炎组(P＜0.01)，血清MMP-3、MMP-9水平在关节炎组与非关节炎组、蝶形红斑组与非蝶性红斑组之间比较差异无显著性(P＞0.05)，TIMP-1水平在肾损害组与非肾损害组、肺炎组与非肺炎组、关节炎组与非关节炎组、蝶形红斑组与非蝶形红斑组之间比较差异无显著性(P＞0.05)。四、SLE患者血清MMP-3、MMP-9、TIMP-1水平与免疫学指标的关系1．血清MMP-3水平抗dsDNA阳性组高于dsDNA阴性组(P＜0.05)，低补体C3组高于非低补体C3组(P＜0.05)，而在ANA阳性组与阴性组、抗Sm阳性组与阴性组、抗SSA阳性组与阴性组、抗SSB阳性组与阴性组、抗RNP阳性组与阴性组、高IgG组与非高IgG组之间比较差异无显著性(P＞0.05)。2．血清MMP-9水平在抗dsDNA阳性组与阴性组、ANA阳性与阴性组、抗Sm阳性组与阴性组、抗SSA阳性组与阴性组、抗SSB阳性组与阴性组、抗RNP阳性组与阴性组、高IgG组与非高IgG组之间比较差异无显著性(P＞0.05)，而在低补体C3组MMP-9水平低于非低补体C3组(P＜0.05)。3．血清TIMP-1水平在抗dsDNA阳性组与阴性组、ANA阳性与阴性组、抗SSB阳性与阴性组、低补体C3与非低补体C3组、高IgG组与非高IgG组之间比较差异无显著性(P＞0.05)，而在抗Sm阳性组、抗SSA阳性组TIMP-1水平高于抗Sm阴性组及抗SSA阴性组(P＜0.05)，抗RNP阳性组低于抗RNP阴性组(P＜0.05)。五、某些血液学指标与血清MMP-3、MMP-9、TIMP-1水平的关系及相关性分析1．外周血白细胞(WBC)降低者和血清白蛋白(ALB)降低者血清MMP-3水平高于无上述表现者(P＜0.05)，而MMP-9水平低于无上述表现者(P＜0.05)，在血沉(ESR)增高组与正常组血清MMP-3及MMP-9水平差异无显著性(P＞0.05)；血清TIMP-1水平在以上各组之间差异均无显著性(P＞0.05)。2．相关性分析表明，血清MMP-3与WBC呈负相关(r=-0.725 P＜0.01)，与ESR呈正相关(r=0.894 P＜0.01)，与ALB无明显相关性(r=0.126 P＞0.05)；血清MMP-9与WBC呈正相关(r=0.636 P＜0.01)，与ESR呈负相关(r=-0.619P＜0.01)，与ALB无明显相关性(r=-0.270 P＞0.05)；血清TIMP-1水平与WBC、ESR、ALB水平均未见明显相关性(r分别为0.062；0.046；0.030 P均＞0.05)。六、10例患者治疗前后血清MMP-3、MMP-9、TIMP-1水平的比较经类固醇激素治疗后SLE患者血清MMP-3水平下降(P＜0.01)，MMP-9水平升高(P＜0.01)，而TIMP-1水平治疗前后无明显变化(P＞0.05)。结论一、血清MMP-3在SLE患者组高于正常对照组，活动组高于非活动组，肾损害组高于非肾损害组，肺炎组高于非肺炎组说明MMP-3参于SLE的发病机制。二、血清MMP-9水平在SLE患者组低于正带对照组，活动组低于非活动组，肾损害组低于非肾损害组，肺炎组低于非肺炎组说明MMP-9同样参于SLE的发病机制。三、血清MMP-3、MMP-9水平可以作为SLE疾病活动性的指标。四、血清MMP-3、MMP-9水平可以作为SLE患者肺损害及肾损害的间接指标。五、血清MMP-3、MMP-9水平可以作为糖皮质激素治疗后SLE病情改善的信号。