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[目的]血管内皮祖细胞(EPCs)在缺血部位的血管新生中发挥着重要的作用,糖尿病引起血管病变导致组织供血不足已为大家所熟知,研究在糖尿病状态下如何较好地动员骨髓血管内皮祖细胞至外周循环以改善组织血供及促进创面愈合具有重要意义。本实验以糖尿病雄性小鼠(db/db male mice)为研究对象,比较AMD3100联合G-CS F与单一使用MD3100对骨髓血管内皮祖细胞的动员效果,并观察在动员后第3d、5d、7d和10d四个不同时间点糖尿病鼠外周血管内皮祖细胞数量的差异。通过优选动员方法和时机,寻找一种能有效动员糖尿病状态下骨髓血管内皮祖细胞的方法,从而为自体骨髓血管内皮祖细胞治疗糖尿病并发慢性难愈合性创面提供一种新的研究思路和理论依据。[方法]采用AMD3100(Selleck公司,Cat No.S3013,Lot.03)、重组人粒细胞集落刺激因子注射液(rhG-CSF,协和发酵麒麟(中国)制药有限公司,生产批：S20140010),参考国内外文献介绍的剂量(AMD3100的注射剂量为6mg/kg*d-1,G-CSF的注射剂量为10Oug/kg*d-1)和方法(糖尿病鼠连续皮下注射6天)进行骨髓血管内皮祖细胞的动员。选用10-11周龄的糖尿病雄性小鼠(避免雌激素的干扰)共60只,采用随机数字表的方法将其分为A组(AMD3100+G-CSF动员组)、B组(AMD3100+NS动员组)和C组(NS空白对照组),各组均为20只。每组在动员后第3d、5d、7d和10d四个时间点随机选择5只糖尿病小鼠,于心脏部位采集外周血并进行免疫荧光染色,通过流式细胞仪检测CD133/Flk-1双荧光阳性细胞在相同微升数血液样品中所占的比例。结果取平均值用x±s(单位%)表示,统计学方法处理后进行比较和分析。[结果]采用流式细胞仪检测各组糖尿病小鼠外周血中CD133/Flk-1双荧光阳性细胞比例,统计分析后结果如下：①C组(NS空白对照组)糖尿病小鼠在动员后第3d、5d、7d和10d四个时间点,其外周血中CD133/Flk-1双荧光阳性细胞比例无差异(p>0.05)。②A组(AMD3100+G-CSF动员组)与B组(AMD3100+NS动员组)糖尿病小鼠在动员后第3d、5d、7d和10d四个时间点,其外周血中CD133/Flk-1双荧光阳性细胞比例有差异(p<0.05),并呈现一定的变化趋势：在动员后第3d、5d、7d逐渐上升,至第7d达到高峰,随后逐渐下降。③比较A、B、C三组之间糖尿病小鼠外周血中CD133/Flk-1双荧光阳性细胞比例在第3d、5d、7d和10d四个时间点的差异,其中A组糖尿病小鼠外周血中CD133/Flk-1双荧光阳性细胞比例较B组高(p<0.05)；B组糖尿病小鼠外周血中CD133/Flk-1双荧光阳性细胞比例较C组高(p<0.05)。[结论]AMD3100联合G-CSF与单一使用AMD3100对糖尿病状态下骨髓血管内皮祖细胞均有动员作用；AMD3100联合G-CSF与单一使用AMD3100两种动员方法下,糖尿病小鼠外周血管内皮祖细胞比例呈现一定的变化趋势：在动员后的第3d、5d、7d逐渐上升,至第7d达到高峰,随后逐渐下降；AMD3100联合G-CSF的动员骨髓血管内皮祖细胞的效果明显强于单一使用AMD3100的动员效果。