β-半乳糖苷酶(β-D半乳糖苷半乳糖水解酶，β-D-galactosid.galatohydrofase，Ec3.2.1.23)通常被称为乳糖酶，它能够催化β-半乳糖苷化合物中β-半乳糖苷键发生水解，还具有转半乳糖的作用。β-半乳糖苷酶催化乳糖发生水解的实用意义较大，故研究较多。β-半乳糖苷酶的天然来源十分丰富，细菌、霉菌和酵母等微生物经发酵可产生β-半乳糖苷酶。该酶在动物体内参与糖类物质的代谢并同细胞的成熟、衰老关系密切。在植物体内能够降解细胞壁的果胶和半纤维素，参与果蔬成熟。　　 我们通过电子克隆、RT-PCR、3RACE的方法从家蚕幼虫中扩增到家蚕β-半乳糖苷酶基因的cDNA序列，并将其命名为BmGal(Bomby.moriβ-galactosidase)，提交到GenBank，登录号为FJ571146。该cDNA序列全长为215.bp，含有编码半乳糖苷酶蛋白氨基酸序列完整的ORF，大小为182.bp，编码606个氨基酸残基，预测分子量为6.kD，其氨基酸序列与无脊椎动物中该蛋白的氨基酸序列同源性较高，含有完整的糖基水解酶GHF-42保守结构域。本研究构建了融合蛋白表达质粒pET-28a-B.Gal，将该重组子转化大肠杆菌BL21(DE3)，用终浓度为0 mM的IPTG诱导重组菌后，作SDS-PAGE分析，在7.kD左右的位置有一条与预期值相符的特异性蛋白条带。利用ONPG为底物检测该表达产物，未检出生物活性。本研究还构建了重组毕赤酵母表达载体pPIC9-γ-B.Gal，将该重组质粒转化巴斯德毕赤酵母GS115，筛选出5株能够产生具有生物活性产物的重组毕赤酵母。本研究提取了家蚕五龄幼虫期、蛹期、成虫期的各组织RNA，用荧光定量PCR的方法，对该基因在家蚕不同发育时期，不同组织表达量进行了比较。检测结果表明，在各组织中，BmGal在睾丸的表达量最高；在不同发育时期，BmGal在五龄幼虫期的表达量最高。