番木瓜籽中异硫氰酸苄酯的抑菌机理

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番木瓜是一种极具营养价值的热带水果,其籽中含有苄基硫代葡萄糖苷(Glucosinolate,GS),是果肉加工的废弃物,当GS接触到芥子酶就会被水解,生成异硫氰酸醋类(Isothiocyanates,ITCs)。ITCs是一类重要的有机合成中间体,公认具有抑菌作用,异硫氰酸辛酯(Benzyl isothiocyanate,BITC)是ITCs中抑菌效果最为明显的一种,所以本实验选取BITC作用于一些致病菌,以期得到其抑菌机理。实验选取大肠杆菌,其浓度值经常被用来作为检测饮水,食物以及药物的卫生学标准;沙门氏菌,该菌属在细菌性食物中毒中占较大的比重,是食物中毒的预防重点之一;金黄色葡萄球菌,是引起许多严重感染的致病菌种类之一。目前,BITC在抑菌方面的研究大多停留在抑菌的定性,虽然开发BITC相关功能产品潜力大,但在理论上却没有相应的支撑,且相比于容易导致遗传物质产生突变的抗生素和抑菌稳定性不强的某些天然抑菌物质,BITC安全高效,因此,有必要进一步推进对BITC相关功效的机理研究。本实验利用滤纸片法进行抑菌的定性,BITC的抑菌圈略小于抗生素,但抑菌效果明显;二倍稀释法测得最低抑菌浓度发现BITC对沙门氏菌(0.5 μL/mL),金黄色葡萄球菌(0.5 μL/mL)的抑制效果强于大肠杆菌(1 μL/mL);通过对微生物生长规律的测定,验证了异硫氰酸苄酯对试验菌株测定周期内(10 h)稳定的抑菌性;通过光学显微镜和扫描电镜的观察,发现BITC对食源性致病菌菌体细胞结构及功能的影响不大;通过测定电导率的差别发现BITC没有改变这些致病菌膜的通透性;用罗丹明123荧光染色法发现BITC对食源性致病菌产能部位的功能造成了影响,同时检测了 BITC对能量代谢有关酶(腺苷脱氨酶,总超氧化物歧化酶,过氧化氢酶)的活性的影响,发现BITC能造成这些酶活力的不稳定;用苯酚-硫酸法测定了菌体糖代谢,用钥酸铵显色法测定了菌体的磷代谢,结果均显示BITC影响的菌体正常的细胞代谢;用一维电泳测定了 BITC对蛋白的影响,并着重测定了拓扑异构酶类,发现BITC对这两类物质都有影响,然而更具体的深入的结论需要进一步探究;通过测定BITC对核酸浓度的影响,发现BITC不会诱导核酸畸变。
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