论文部分内容阅读
目的鉴定人乳腺正常组织、癌旁组织、癌组织与人乳腺癌细胞系MCF-7中SP(侧群细胞,side population)细胞含量是否有差异;同时比较人乳腺癌细胞系MCF-7中,SP细胞与NSP(非侧群细胞,non side population)细胞表面标记的特点,分析SP细胞的含量与影响乳腺癌预后的相关因素的关系。进一步探索乳腺肿瘤干细胞。方法1.制备人乳腺正常组织、癌旁组织、癌组织细胞悬液和人乳腺癌细胞系MCF-7细胞悬液,一组加入Hoechst33342染色,另一组同时加入拮抗剂维拉帕米,通过流式细胞仪测定SP细胞含量;2.用流式细胞仪分选出人乳腺癌细胞系MCF-7中的SP细胞和NSP细胞,检测这两种细胞的各种表面蛋白或抗原和细胞周期增殖状况;3.分析SP细胞含量对乳腺癌患者预后的影响。结果1.SP细胞在人乳腺正常组织、癌旁组织、癌组织和人乳腺癌细胞系MCF-7中的含量分别为(0.54±0.17)%、(7.23±1.12)%、(8.34±0.96)%和(9.58±1.27)%,且它们之间的SP细胞含量具有差异显著性(P<0.05);2.CD38、CD117、CD34在SP细胞群中和NSP细胞群中的表达率均无显著性差异(P=0.256,P=0.920,P=0.317);SP细胞群中,CD133、ABCG2的表达率明显高于NSP细胞群中的表达率(P=0.000,P=0.000);CD24在SP细胞群中的表达率显著低于NSP细胞群中的表达率(P=0.000);3.SP细胞群中,处于G0/G1静止期的细胞比例明显高于NSP细胞群中的(P=0.000);而处于S、G2/M期的细胞数在NSP细胞群中显著多于SP细胞群中的(P=0.001,P=0.000);NSP细胞群中的细胞高表达Ki-67,与SP细胞比较差异有显著性(P=0.000);SP细胞有较低的凋亡率,而NSP细胞的凋亡率则较高,两者相比存在显著性差异(P=0.000);4.乳腺癌患者中,SP细胞的含量与乳腺癌患者的危险因素有显著相关性(P<0.05)。结论1.人乳腺正常组织、癌旁组织、癌组织与人乳腺癌细胞系MCF-7中都存在SP亚群,且含量不同,能够为肿瘤干细胞的鉴定和提纯提供一定的科学参考价值。2.人乳腺癌细胞系MCF-7中含有比例较高的SP细胞,且SP与NSP细胞有可以分别鉴定和纯化的抗原差别。选择SP方法和表面抗原标记法分离乳腺癌干细胞具有科学性。3.乳腺癌患者中,SP细胞含量高的患者其预后较SP细胞含量低的患者差,为临床上评估患者的病期及预后提供一定的参考价值。