【摘 要】
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目的:研究大肠杆菌可溶性表达的重组I型人角质细胞生长因子N端缺失23个氨基酸后的突变体(K23、K25、K102和K106)其二硫键的不同配对形式对生物活性和稳定性的研究。方法(1)构
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目的:研究大肠杆菌可溶性表达的重组I型人角质细胞生长因子N端缺失23个氨基酸后的突变体(K23、K25、K102和K106)其二硫键的不同配对形式对生物活性和稳定性的研究。方法(1)构建各突变体的重组工程菌BL21(DE3)StarpLySs-pET-3c-KGF(K23、K25、K102和K106);(2)利用SP sepharoseF.F和Heparin-CL-6BF.F纯化得到各突变体纯品; (3)将重组I型人角质细胞生长因子缺失突变体(K23、K25、K102和K106)用胰蛋白酶酶切后,经TCEP还原,采用液质联用方法,绘制质量肽图。对比还原肽图和非还原肽图特定肽段,确定其二硫键配对形式;(4)通过NBL-7细胞、NIH3T3细胞、小鼠CCl4急性肝损伤模型进行体内外生物活性评价。结果K23活性和稳定性最好,K25最差。结论①Cys102-Cys106可稳定KGF-I构象;②Cys106缺失或突变成其它氨基酸会导致稳定性极差;
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目的:通过对补虚分消走泄法治疗慢性肾脏病3-4期气血两虚、湿热内蕴证的病例观察,对其临床疗效进行初步评价,为临床延缓慢性肾脏病进展提供新思路。方法:将符合纳入标准的60例病例进行随机分组,对照组30例、试验组30例。两组均采取慢性肾脏病综合治疗,对照组于西医基础治疗上加用尿毒清颗粒,试验组于西医基础治疗上加用芪连泄浊汤,疗程均为8周。观察两组患者中医证候积分、血肌酐、尿素、肾小球滤过率、血红蛋白、
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