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目的：构建含有变异链球菌表面蛋白A区编码基因pacA和葡糖基转移酶（GTF）催化区编码基因cat，佐剂CTB的编码基因ctxB和靶向蛋白DOCK8核心功能区DHR编码基因的融合基因表达质粒，利用番茄果实特异性启动子E8启动融合蛋白的表达，添加柔性肽基因修饰，构建稳定高效的番茄果实特异表达质粒，为下一步转化番茄植株提供实验基础。方法：实验共分二部分：第一部分变异链球菌cat-pacA-ctxB-DOCK8/DHR融合基因表达质粒的构建①设计特异引物，通过PCR获得变异链球菌表面蛋白PAC的编码基因pacA、葡糖基转移酶编码基因cat、无功能糖基转移酶样蛋白（DOCK8）的核心功能区DHR编码基因；②T-A克隆构建中间载体pMD-cat、pMD-pacA-ctxB、pMD-DOCK8/DHR质粒；③酶切pMD-cat、pMD-pacA-ctxB、pMD-DOCK8/DHR质粒获得目的基因，通过定向克隆与pET32a(+)表达载体进行重组，获得重组质粒pET-cat-pacA-ctxB-DOCK8/DHR；第二部分植物表达质粒p2301-E8-cat-pacA-ctxB-DOCK8/DHR的构建限制性内切酶酶切pET-cat-pacA-ctxB-DOCK8/DHR获得融合基因片段cat-pacA-ctxB-DOCK8/DHR，经定向克隆与植物转化载体pCAMBIA2301重组，加入从番茄基因组中所提出的番茄果实特异性启动子E8，获得植物表达质粒p2301-E8-cat-pacA-ctxB-DOCK8/DHR。结果：1）构建的表达质粒pET-cat-pacA-ctxB-DOCK8/DHR经KpnI、SalI双酶切，能得到约4.9kb大小片断，与预计目的基因片断大小相同，经测序证实插入的方向正确。2）重组质粒p2301-cat-pacA-ctxB-DOCK8/DHR经KpnI、SalI酶切得到约11.6kb和4.9kb的目的片断。结论：成功构建了融合基因表达质粒pET-cat-pacA-ctxB-DOCK8/DHR；成功构建植物表达质粒p2301-E8-cat-pacA-ctxB-DOCK8/DHR。