【摘 要】
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目的:椎间盘源性疼痛,是椎间盘退变或纤维环破裂后刺激疼痛感受器引起的腰痛,是最常见的骨科疼痛之一。人们对椎间盘源性疼痛存在很多误区,在广大经济欠发达地区误诊误治现象严重,很难得到早期、有效、规范的诊治。虽然椎间盘退变是椎间盘源性疼痛的主要病因,但在临床诊疗及科研工作中,一直把椎间盘退变作为研究重点,忽视了疼痛才是影响患者生活质量的亟需解决的问题。如果疼痛未早期干预,极易迁延不愈,转化为慢性病理性疼
【基金项目】
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国家自然科学基金青年科学基金项目,81802190,Tmem100调控TRPV1-TLR4神经免疫复合体在慢性盘源性疼痛中的作用机制研究；
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目的:椎间盘源性疼痛,是椎间盘退变或纤维环破裂后刺激疼痛感受器引起的腰痛,是最常见的骨科疼痛之一。人们对椎间盘源性疼痛存在很多误区,在广大经济欠发达地区误诊误治现象严重,很难得到早期、有效、规范的诊治。虽然椎间盘退变是椎间盘源性疼痛的主要病因,但在临床诊疗及科研工作中,一直把椎间盘退变作为研究重点,忽视了疼痛才是影响患者生活质量的亟需解决的问题。如果疼痛未早期干预,极易迁延不愈,转化为慢性病理性疼痛,长期的疼痛刺激促使中枢神经系统发生病理性重构,使疼痛的进展愈加难以控制,给患者造成巨大的身心创伤,常伴有生理、心理和社会功能改变,不仅影响躯体功能,更严重影响生活质量。因此,寻找慢性椎间盘源性疼痛调控的关键机制及早期有效的靶向干预具有重要意义。本研究旨在研究Tmem100表达及相应的意义,为疼痛靶向干预做好前期铺垫。方法:本研究共纳入雄性SD大鼠48只,随机分为4组:正常（Normal）组,假手术（Sham）组,坐骨神经缩窄性损伤（Chronic constriction injury,CCI）组,胫神经损伤（Tibial nerve injury,TNI）组,每组12只。连续测量大鼠术侧后足机械性撤足阈值（Paw withdrawal mechanical threshold,PWMT）和热缩足潜伏期（Paw withdrawal thermal latency,PWTL）至术后14天,观察并记录大鼠一般行为学和痛行为学的变化情况。观察大鼠痛行为学变化后,即大鼠模型建立14天后给予处死大鼠,取大鼠L4-6 DRG,利用qRT-PCR、Western Blot和免疫组化、免疫荧光染色技术分别检测各组L4-6 DRG中Tmem100的转录水平以及蛋白表达水平的变化情况。结果:1.行为学结果:CCI组、TNI组有明显缩足、舔足、足悬空、足外翻等行为学变化。2.痛行为学结果:CCI组大鼠术后第3天PWMT开始明显下降,术后第10天下降至最低水平,并可持续至术后14天;TNI组大鼠术后第1天PWMT开始明显下降,术后第7天下降至最低水平,并可持续至术后14天。TNI组、CCI组PWMT、PWTL比Normal组、Sham组低,可见统计学差异（P<0.05）,Normal组和Sham组PWMT、PWTL未见明显差异（P>0.05）,CCI组和TNI组PWMT、PWTL未见明显差异（P>0.05）。3.qRT-PCR结果:与Normal组、Sham组相比,TNI组、CCI组的m RNA表达显著降低（P<0.05）。Normal组与Sham组相比较未见明显差异（P>0.05）。TNI组与CCI组相比较未见明显差异（P>0.05）。4.Western Blot结果:与Normal组、Sham组相比较,TNI组、CCI组Tmem100蛋白表达显著降低（P<0.05）。而Normal组与Sham组相比未见明显差异（P>0.05）。TNI组与CCI组相比未见明显差异（P>0.05）。5.免疫组化结果:与Normal组、Sham组相比,TNI组、CCI组Tmem100弱阳性低表达（P<0.05）。余组间比较无明显差异（P>0.05）。6.免疫荧光染色结果:与Normal组、Sham组相比,TNI组、CCI组荧光强度明显降低（P<0.05）。而余组间比较无明显差异（P>0.05）。结论:我们成功构建了CCI、TNI两种模型,数据表明,Tmem100在上述模型DRG中表达下调,其可能参与了疼痛的发生与传导过程。
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