基于适配体和纳米材料的四环素特异性识别生物传感器的研究与应用

来源 :山东理工大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liang__fei
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四环素是一类广谱性的抗生素。如果使用剂量过大或者滥用,会造成其在食品中的残留,对人类健康产生不同程度的危害。因此,建立快速、灵敏的四环素残留现场检测方法对提高食源性动物食品的安全性具有重要的现实意义。本论文基于具有高亲和力的适配体和新型纳米材料,以四环素为检测模板,构建了以微阵列电极、丝网印刷碳电极为反应平台的四环素残留检测新方法。主要研究内容如下:1、基于纳米氧化锡锑-壳聚糖修饰的适配体传感器的制备研究纳米氧化锡锑具有高导电性,利用壳聚糖优异的成膜性和吸附性制备纳米氧化锡锑-壳聚糖复合膜。研究发现,该复合膜在修饰电极的吸附性和稳定性上具有很好的效果,壳聚糖的多孔结构有利于生物活性物质的固定。微阵列电极可以放大检测信号,降低非目标物的干扰,结合这一优势实现对待测物的高灵敏的检测。将所制备的适配体传感器应用到牛奶实际样品的检测中,结果表明该适配体传感器在10-1~106μg/L浓度范围内具有良好的线性关系,检出限达到3.0μg/L。2、基于二茂铁/纳米碳纤维-纳米金修饰的比率型适配体传感器的制备研究二茂铁、纳米碳纤维导电性良好,可以有效地改善电极性能。通过自组装“Au-S”键固定适配体,通过二茂铁/纳米碳纤维-纳米金分别制备的适配体传感器的两种检测结果之间的比率关系进行目标物的检测,可以在一定程度上提高传感器检测的精确度、减小批次之间的检测差异。结果表明,四环素在10-2~106μg/L的浓度范围内具备良好的线性关系,检测限为0.33μg/L。3、基于酶辅目标物循环和介孔碳-纳米金修饰的适配体传感器的制备研究核酸外切酶III对DNA双链的特异性识别序列没有严格要求。选用核酸外切酶III用于辅助目标物循环信号放大。纳米材料可以增大电流信号,然后在酶的作用下实现二次信号放大,从而实现更灵敏的检测,检测限达到0.03μg/L。在实际样品分析时将牛奶样品稀释3倍后直接进行测定,结果表明该种预处理方法能够实现对牛奶样品中四环素残留的现场快速检测。对比上述三种适配体传感器,结果表明,所制备的基于酶辅目标物循环和介孔碳-纳米金修饰的适配体传感器在信号响应和检测限方面具有更好的优势,而且通过比较样品的预处理方法发现,该方案中将实际牛奶样品直接稀释的预处理方法简便可行,结合丝网印刷碳电极的便携性能够简便有效地实现牛奶中四环素残留的现场快速检测。
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