【摘 要】
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头孢克肟（cefixime,CE）属于第三代头孢菌素类药物,因其具有高效和低毒等优势,在临床上被广泛应用。CE对胚胎引起的发育毒性,尤其是对耳泡发育的影响还有待深入研究。本研究以斑马鱼胚胎为动物模型,检测了CE造成斑马鱼胚胎耳泡的发育障碍,并探讨了关联的毒性机制。用不同浓度的CE（0-100μg/m L）给受精后4小时（4 hpf）的斑马鱼胚胎进行暴露,对斑马鱼幼鱼的耳泡发育、行为学变化、软骨发育
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头孢克肟（cefixime,CE）属于第三代头孢菌素类药物,因其具有高效和低毒等优势,在临床上被广泛应用。CE对胚胎引起的发育毒性,尤其是对耳泡发育的影响还有待深入研究。本研究以斑马鱼胚胎为动物模型,检测了CE造成斑马鱼胚胎耳泡的发育障碍,并探讨了关联的毒性机制。用不同浓度的CE（0-100μg/m L）给受精后4小时（4 hpf）的斑马鱼胚胎进行暴露,对斑马鱼幼鱼的耳泡发育、行为学变化、软骨发育,耳泡发育关联基因及蛋白质水平的变化进行了检测。结果显示,当胚胎发育到96 hpf时,随着CE浓度的升高,从而引起了斑马鱼胚胎的死亡率显著升高,也造成了孵化率的显著降低（p＜0.05）。当胚胎发育到120 hpf时,100μg/m L的CE造成幼鱼的游泳距离显著缩短（p＜0.05）,Fgf8a抑制剂和BMP抑制剂也引起了相似的行为学变化。我们发现CE显著降低了斑马鱼幼鱼球囊和椭圆囊的面积以及耳泡的面积（p＜0.001）。2-[4-（Dimethylamino）styryl]-1-ethylpyridinium iodide（DASPEI）荧光染色发现,随着CE浓度的升高,斑马鱼侧线毛细胞的荧光斑点显著减少。通过RT-qPCR检测骨骼相关基因表达情况,在72 hpf和120 hpf,CE造成了软骨和硬骨关联基因（Fgf8a,Sox9a,Sox9b,Col2α1a,Col1a1,Bmp4,runx2a,Dlx2a,和eya4）的下调。也引起了atp1a2,atp1a3b,和atp1b2b等Na+/K+-ATPase酶关联基因的表达显著下调。另外,与对照组相比,100μg/m L CE也造成了Na+/K+-ATPase活性的降低（p＜0.01）。并进一步通过抗体染色验证发现,CE显著降低了Na+/K+-ATPase蛋白质水平的表达。试验结果表明,头孢克肟对斑马鱼胚胎发育有显著的毒性影响,尤其是耳的发育障碍,这种障碍可能与Na+/K+-ATPase密切关联。建议对孕妇和儿童慎用。
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