磷酸替米考星在肉鸡组织中的残留消除研究

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替米考星是一类由泰乐菌素半合成的畜禽专用抗生素,属大环内酯类。它对所有革兰氏阳性菌及部分革兰氏阴性菌、支原体、螺旋体都有良好的抗菌作用,对胸膜肺炎放线杆菌、溶血性巴氏杆菌、多杀性巴氏杆菌及畜禽支原体具有非常强的抗菌活性,广泛应用于治疗家畜肺炎、禽支原体病及泌乳动物的乳腺炎。磷酸替米考星是在替米考星的基础上添加磷酸基团,增加了替米考星的水溶性,尽管其起治疗作用的成分依然是替米考星,但水溶性的改变更便于其在兽医临床上的使用。本研究针对抗菌新兽药10%磷酸替米考星可溶性粉进行了肉鸡组织中磷酸替米考星HPLC检测方法的建立和磷酸替米考星在肉鸡组织中的残留消除规律的研究,旨在为磷酸替米考星在肉鸡饲养中制定安全合理的休药期提供科学依据。为了解磷酸替米考星在肉鸡肝脏、肾脏和肌肉组织中的残留消除规律,制订安全合理的药物休药期,本研究首先建立了肉鸡组织中替米考星残留量检测的高效液相色谱(HPLC)方法。结合国家标准及国内外学者相关研究,确定流动相比例为乙腈-四氢呋喃-磷酸二丁胺缓冲液(pH2.5)-超纯水的比例为10:5:5:80,采用C18色谱柱(4.6×50 mm,5μm),紫外检测器280 nm测定,样品选用BondElut C18固相萃取柱净化,该方法平均回收率在77.02%-115.04%之间,变异系数在1.86%-19.19%之间。所得色谱图出峰时间适宜,峰形良好,响应值高,替米考星与其它组分分离良好,测得的峰面积与对应的浓度呈良好的线性关系,其线性范围为0.05-25.0Hg/mL (R2= 0.9998),肌肉、肝脏和肾脏中替米考星的检测限分别是0.010、0.025和0.025μg/g,定量限分别是0.020、0.050和0.050μg/g。三个浓度的平均添加回收率均高于75%。利用建立的HPLC方法,我们对磷酸替米考星可溶性粉的代谢物替米考星在肉鸡组织中的残留情况进行了检测分析。本试验以推荐剂量16 mg/kg剂量连续口服7d10%磷酸替米考星可溶性粉。试验结果显示,在停药后4h到停药后15d,体内替米考星在肝脏、肾脏和肌肉组织中的残留逐渐下降。参考农业部兽药残留标准,并经休药期计算软件计算,从停药4h到停药后15 d替米考星在肉鸡体内肝脏、肾脏和肌肉组织中的残留即出现显著下降;其中,在肝脏中的残留最高,其次是肾脏,而肌肉组织内的残留较低。替米考星在肝脏、肾脏和肌肉组织的休药期分别为9.6 d、12.8 d和13.96 d,按双单侧95%置信区间计算替米考星在肉鸡的休药期应该为14 d。
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