论文部分内容阅读
据世界卫生组织预测,到2030年,全世界糖尿病病患数量将会达到3.66亿人次,而这其中有高达95%的比例为2型糖尿病患者(Type2Diabetes Mellitus, T2DM)所占有。目前2型糖尿病的治疗以西医为主,但2型糖尿病的诸多并发症以及患者用药后的毒副作用是广大医务工作者及研究者所面临的重大难题,这是巨大的挑战;不过这同时也为中医药治疗糖尿病提供了更为广阔的发展空间,因而也是中医药发展的良好机遇。针灸防治糖尿病(Diabetes Mellitus, DM)及其并发症在中国已有两千多年的历史。近些年来,针灸疗法在DM的临床治疗以及护理过程中得到了越来越广泛的运用,并且疗效显著。胰俞穴为经外奇穴,与胰腺具有密切联系。有学者认为胰俞穴就是胰脏之气汇聚的部位,具有调节胰腺功能,促进胰岛素分泌,改善血糖的功能。查阅文献资料,结果显示:临床上采用针灸治疗糖尿病大多取胰俞穴为主穴并配合其它穴位使用,虽然文献中均显示降糖效果明显,但是关于胰俞穴这一单穴在临床上及动物实验研究中的治疗效果鲜有文献提及。因此,本实验通过电针“胰俞”穴对T2DM大鼠进行干预,以观察“胰俞穴”这一单穴治疗对T2DM大鼠的降糖效果。[目的]观察电针“胰俞”穴对2型糖尿病大鼠胰岛素原mRNA表达的调控,并对其血糖、瘦素、抵抗素等脂肪细胞因子的影响;验证电针“胰俞”穴对T2DM大鼠的疗效;阐明电针治疗T2DM的关键作用环节;揭示电针“胰俞”穴对T2DM的可能作用机制。[方法](1)将58只大鼠根据随机数字表随机选取8只作为正常对照组,给予正常饲料喂养;余下50只用于造模,选用高脂高糖饲料喂养联合链脲佐菌素(Streptozotocin, STZ)腹腔注射的方法建立T2DM的大鼠模型,成模后的T2DM大鼠再次根据随机数字表分为模型对照组、电针“胰俞”穴组、电针“脾俞”穴组、电针“肾俞”穴组;(2)以Real-time PCR法测定胰腺组织中胰岛素原mRNA的表达水平;(3)用罗氏活力型血糖仪及其配套试纸测量2型糖尿病大鼠空腹血糖;(4)采用放射免疫法分别测定大鼠血清胰岛素(Insulin, INS)及血清中脂肪细胞因子瘦素(Leptin, LEP)、抵抗素(Resistin,RES)、脂联素(Adiponectin,ADP)的含量;(5)采用苏木素一伊红(HE)染色镜下观察胰腺组织的病理性改变,用免疫组化法检测胰岛细胞中胰岛素的阳性表达平均光密度值(Average optical density, AOD).[结果](1)采用高脂高糖饲料喂养合并小剂量链脲佐菌素(Streptozotocin,STZ)腹腔注射的方法能够成功复制T2DM大鼠模型,对50只大鼠进行造模,42只成模,造模成功率为84%。(2)与正常对照组相比,模型对照组大鼠胰岛素原mRNA表达明显降低(P<0.01);与模型对照组相比,三个电针治疗组大鼠胰岛素原mRNA表达均大幅上升(均P<0.01),以电针胰俞组尤为明显;(3)成模后的2型糖尿病大鼠与正常对照组大鼠比较,血糖大幅升高(P<0.01),体重显著降低(P<0.01);与模型对照组比较,电针胰俞组及电针脾俞组大鼠的血糖明显下降,以电针胰俞组下降最为明显(P<0.01);(4)与正常对照组相比,模型组血清胰岛素含量升高,但差异无统计学意义(P>0.05),三个治疗组大鼠血清胰岛素均降低,以电针脾俞组、电针肾俞组尤为明显,具有极显著统计学差异(均P<0.01);与正常对照组相比,模型对照组大鼠血清瘦素、抵抗素、脂联素均降低,有统计学差异(均P<0.05);(5)与正常组对照组比较,模型对照组大鼠胰腺中胰岛素平均光密度值(AOD)显著降低(P<0.05);与模型对照组比较,电针胰俞组及电针脾俞组大鼠胰腺中胰岛素平均光密度值(AOD)均有明显上升,电针胰俞组尤为明显(分别P<0.01,P<0.05)。[结论](1)采用的造模方法切实可行,所建立的2型糖尿病大鼠模型稳定;(2)电针“胰俞”穴的可能降糖机制:“胰俞”穴与胰腺均受位于T6-T10的脊髓节段的交感神经支配,“胰俞”穴符合神经节段支配原理。在“胰俞”穴的神经节段支配中,脊髓作为一个初级中枢,既接收来自“胰俞”穴的针刺信号,也接收来自胰腺的病理信号,脊髓为这两种信号的整合提供场所。此外,电针“胰俞”穴还可能通过神经-内分泌-免疫途径产生全身性的调节作用。电针“胰俞”穴可在一定程度上改善2型糖尿病大鼠胰岛β细胞功能受损的状况,增强胰岛素原mRNA的表达,使胰岛素敏感性增加,胰岛素抵抗降低,促进血糖下降。综上所述,电针2型糖尿病大鼠“胰俞”穴可以从基因层面增加胰腺中胰岛素原mRNA的表达,使胰岛素原mRNA的表达正向发展;从细胞分子水平上来说可以改善胰岛β细胞的功能状态,促进受损细胞的恢复,从而有利于胰岛素降糖功能的正常发挥和胰岛素抵抗的改善,这也是电针“胰俞”穴降糖的重要机理之一。