青霉病和灰霉病是苹果贮藏期的主要侵染性病害,是造成腐烂损失的基本原因。长期以来,使用化学杀菌剂一直被认为是最有效的方法,但是存在着农药残留、环境污染和病原菌抗药性等诸多弊端,迫切需要新的安全的方法来取而代之。生物防治是选择对产品以及人体不造成危害的微生物,利用微生物之间的拮抗作用,抑制病原菌生长的一种有效防治采后病害的新途径。 本研究旨在分离、筛选能够抑制苹果采后青、灰霉的拮抗酵母菌株,并测定所筛选出的菌株AY-2和F-5不同处理分别对苹果青霉病和灰霉病的抑制效果,以及在果实伤口的定殖情况。主要结果如下: 1.拮抗菌的分离和筛选:用稀释平板法,从果实表面以及果园根际土壤中分离得到376个菌株。通过初筛和复筛,应用琼脂移块法,离体筛选出12个菌株对青霉菌（Penicillium expansum）有拮抗作用,11个菌株对灰霉菌（Botrytis cinerea）有拮抗作用。进一步通过混菌试验和果实接种法,活体筛选出分别能明显抑制青、灰霉病的拮抗酵母菌AY-2和F-5,常温下抑菌率分别为81.67%和83.33%。 2.拮抗菌的抑菌试验:当拮抗菌浓度为10⁶～10⁸ CFU/mL时,生物防治的效果与拮抗菌的浓度成正相关;分别在接种3×10⁸ CFU/mL拮抗菌AY-2和F-5的前48h、24h、4h、0h、后4h、24h、48h接种病菌,同时和推后病菌接种时间,都可以维持抑菌效果,但是提前接种病菌拮抗菌的抑菌力会有所降低。拮抗菌的接种时间越早防治病害的效果越明显;AY-2与34-9等体积混合用于防治青霉病,果实发病率为8.33%,优于AY-2和34-9单独使用的效果,差异显著;AY-2与F-5混菌,灰霉发病率为15%,34-9与F-5混合,灰霉发病率为13.33%,两种组合均稍好于F-5和34-9单独使用的效果,但并不显著;CaCl₂能够明显增强拮抗菌AY-2的抑菌效果,壳聚糖与拮抗菌结合使用,青、灰霉发病率分别约高于单独使用时的1和3倍,抑菌力降低。 3.拮抗菌的生长动态:拮抗菌AY-2和F-5在有无青、灰霉菌作用的情况下都能够在果实伤口迅速生长定殖。菌株AY-2接种48h后,数量增加至116.67倍;同时接种青霉病菌,96h后AY-2的数量可增加至132.67倍;拮抗菌F-5接种72h后,数量增加了近200倍,同时接种灰霉病菌,72h后繁殖数量是起始值的290.12倍。