【摘 要】
：
血栓性疾病日益威胁着人们的生命健康，现有的抗栓或溶栓药物种类繁多，根据作用机制不同，发挥着重要的作用。然而这些药物普遍存在半衰期短、纤维蛋白亲和力差或出血风险大等缺陷
论文部分内容阅读
血栓性疾病日益威胁着人们的生命健康，现有的抗栓或溶栓药物种类繁多，根据作用机制不同，发挥着重要的作用。然而这些药物普遍存在半衰期短、纤维蛋白亲和力差或出血风险大等缺陷，因此开发新型溶栓药物仍然十分必要。柞蚕(Antheraea pernyi)属鳞翅目大蚕蛾科，是典型的吐丝营茧昆虫之一。在蚕蛹羽化过程中，下颚腺会分泌吐出液，水解茧壳中的丝胶，蚕蛾便可“脱茧而出”了。在其吐出液中含有一种酶，称其为溶茧酶(cocoonase)，不仅可以水解丝胶，还具有精氨酸酯酶活力，与胰蛋白酶性质相近，有望开发成为一种新型溶栓药物。 根据前人的初步研究，利用CM-Sepharose FastFlow弱阳离子交换层析和SephadexG-50两步法从柞蚕吐出液中分离得到柞蚕溶茧酶。通过精氨酸酯酶活力测定了其酶动力学参数和最适温度及pH值，利用纤维蛋白原降解实验和纤维蛋白平板实验初步验证了其溶栓功能。根据N端测序的氨基酸序列，设计简并引物，利用RACE技术克隆得到柞蚕溶茧酶基因全长，并利用大肠杆菌和Bac to Bac昆虫杆状病毒表达系统分别进行了原核表达和真核表达。 实验结果表明，成功纯化出柞蚕溶茧酶，其酶动力学参数Km值和Vmax分别为2.577×10-3 mol/L和4.09×10-3μmol/L/s，且其最适温度和最适pH值分别为30℃和pH8.0。克隆溶茧酶基因全长783 bp，编码261个氨基酸，通过BLAST同源性比对发现，柞蚕溶茧酶含有胰蛋白酶家族保守序列“IVGG”。利用MEGA5.0软件进行系统发育树分析，发现柞蚕溶茧酶与家蚕溶茧酶具有62％的相似度，属于同一进化分支。通过PROSITE蛋白数据库分析发现，氨基酸34-260为丝氨酸蛋白酶家族保守域，并且发现多个丝氨酸蛋白酶家族特有的模型。 通过细胞毒性试验发现，当样品浓度达200 mg/ml时，Hela细胞形态出现变化，活细胞数有所减少。皮内注射柞蚕溶茧酶实验发现，其出血活性(MHD)为2.5 mg/kg体重。体外溶血试验中，当加入30μg溶茧酶时，24 mg血块几乎全部溶解。在出血活性安全范围内，体内溶栓实验中，注射剂量分别为50、100、150、200μg时，小鼠尾部血栓比例呈逐渐减小的趋势，分别为25.45±4.28％、20.21±7.50％、13.98±4.05％和7.52±1.12％。这表明，柞蚕溶茧酶具有较好的溶栓效果，有望开发成为一种新型溶栓药物。
其他文献
我的侏儒兄弟 这里，是你两倍高的人间 你有多于我们的 悬崖，就有了两倍的陡峭 你有更漫长的路 要赶。兄弟，你必须 比我们，提前出发 并准备好，比我们 咽下更多的苦，接纳 更多的羞辱，与呵斥 在路上，我的侏儒兄弟 你那么小，只能背负 少得可怜的干粮 你那么小，却要流下 两倍的汗，和血 与己书 许多事情不会有结局了。坏人们 依然对钟声过敏，更坏的人 充耳不闻。我也怀
山石之上 最初我理解的古村落，往往囿于地势偏远深幽，也唯有一个远，方显世外桃源的安静与闲适。而这古冀州边的西井峪，近在眼前抬头便见。 成村之地多有典故，西井峪传奇只在家谱里。据载明代村里周氏先祖周玉基，曾为戚继光镇守蓟州副将，素与元军作战勇猛，屡获战功。但沙场无常，也或许是犯了穷寇勿追之大忌，将军居然死于一次残兵交战，狼烟散尽刀光消弭，荒野英雄已是尸首支离。遥望边城，万历帝赐金头银躯以善其身，
成都的夜晚似乎是从一首歌开始的，是从玉林路的“little bar”开始。当我们从春熙路和宽窄巷子返回宾馆，九月的暮色已经围拢上来，路边的梧桐也树影婆娑，同行的兄弟却一个人走向了玉林路。 他发到朋友圈的照片，夜色中，只看到“小酒馆”和“little bar”招牌有着晕黄的光亮，而门前依稀伫留着仍可以辨别出青春的身影。屋内不甚明亮，已经没有座位，挨挤坐着的仍是年轻的面庞。城市里太多的青春需要在这里
乙醛脱氢酶(ALDH,E.C.1.2.1.X)广泛存在于各种动物、植物和微生物体内。在人类和其他许多动物体内,线粒体乙醛脱氢酶能把对生物体有害的醇类转化,所以在细胞解毒研究中乙醛脱
从更乐镇政府出发，经更乐，过天铁，绕九峰，以现代化的速度，一步步向心仪已久的大洼村靠近。穿过并不太长的张家庄隧道，就像穿越时空隧道，进入了一个原生态的世界。 一 隔着车窗就望见，天明显小了，蓝了；路明显陡了，窄了；灰尘少了，石头多了。与山那边相比，这里更像是山里了。我毫无理由地认为，当年陶公进入桃花源，跟我这时的感觉肯定有相似之处。 还没进村，就远远望见一座巨型的孔子雕塑矗立在山头；“莲花谷
在我的家乡有一座名叫“窦氏青山”的土山，土山下面埋葬的就是汉武帝时期太皇太后窦漪房的父亲窦青。历史上这一带水源丰沛，多为沼泽洼地，窦青钓鱼为生，不慎落水溺死，后被文帝追封为安成侯。景帝即位，窦漪房被封为太后。为纪念父亲，遂在其溺水之地堆土为山，建起一座高30余丈，周长1000余步的大冢。其后各个朝代相继在“窦氏青山”南坡山腰的平台上建起了龙王庙、仙姑庙等五六座庙宇，庙宇周围遍植松柏槐榆等乔木，到近
横条图和网络图是工程项目施工进度计划管理常用的两种方法,对工程项目的施工进度计划的制定和控制有重要意义.但是,两者在表示工程的“形象”方面存在明量不足.为了更直观形
终究是一代英雄，军事与战略家、革命家、政治家，当然更是符合中国道统的人生典范。去仪陇的车上，我就这样想。在近代，特别是诸多战神战将之间，朱德可能是最近乎完美的。一个人能够在激荡的社会现实中懂得顺势而为、适可而止、团结合作、宽怀为本、独善其身，就是一种美德。 从1992年到现在，我一直是一名军人。任何人事和团体都是有传承的。尽管过去了很多年，但对于军队的缔造先驱，我始终能够想起来，并且脑海里迅速出
受伤的蜥蜴 蜥蜴——这是《辞海》中一种动物的名字。准确地说，应该是一个物种的总称。在动物学上属于爬行纲，是有鳞目的一个亚目。从习性上说，蜥蜴多生活在平原、山地、树上、水中，以昆虫、蜘蛛、蠕虫等为食；从生态上说它多分布于热带和亚热带。从科属上说又分为蛇蜥、草蜥、巨蜥、蛤蚧、壁虎等。在我最喜欢的一档电视节目《动物世界》中，我知道了在南美洲等处还有更稀奇的“鬣蜥”和“蚓蜥”等，“鬣蜥”长得头角峥嵘，像