甲型肝炎(甲肝)是由甲肝病毒(HAV)引起的,是各种肝炎中流行面积最广、发病率最高的疾病,接种甲肝疫苗是预防甲肝的有效措施。临床应用表明,甲肝疫苗是安全的,免疫原性极佳,疫苗应用前景广阔。现应用甲肝疫苗多采用减毒株灭活制成,安全可靠,但制备工艺复杂,价格昂贵。因此,改变生产工艺,降低成本,生产更优质的甲肝疫苗将是不断探索的新方向。本研究采用Vero细胞生产的甲肝灭活疫苗经培养、收获、提纯、甲醛灭活等工艺制成。采用BL-08株甲型肝炎病毒按适宜稀释后接种单层Vero细胞,置35℃培养12-14天。收获病毒后,采用DEAE Sepharose FF阴离子交换层析、Sepharose 4FF凝胶层析等方法对初步提取自Vero细胞内的甲型肝炎病毒进行分部纯化,后加入终浓度为1/4000甲醛溶液于37℃持续振摇灭活。然后采用DEAE Sepharose FF阴离子交换层析柱经基础平衡液、阶段洗脱后,分别收集甲型肝炎病毒抗原,加入非活性成分后,冻干制成甲肝疫苗。该甲型肝炎灭活疫苗(Vero细胞)的生产工艺路线稳定、可行,为甲肝的大规模生产提供了可靠的依据。