枣(ZiziphusjujubaMill.)是鼠李科(Rhamnaceae)枣属(Ziziphus Mill)植物,在中国特有的经济林和果树树种中扮演着重要的角色,也是我国第一个完成全基因组测序的多年生木本干果树种,发展前景较大。然而近些年枣疯病的出现给整个枣产业造成了巨大的损失,发病三四年后即可造成整株死亡,轻者减产,严重的造成毁园。因此枣疯病成为大家研究的焦点,也是难点。枣疯病是一种典型的植原体病害,植原体很难进行体外培养,因此通过研究植原体分泌的效应因子与其寄主的互作模式,从而明确效应因子的致病机理是今后植原体病害的主要研究方向。本研究以枣疯病植原体基因组为基础,以效应因子致病机制为理论依据。通过生物信息学方法初筛致病因子,挑选出最典型的具有核定位的Zaofeng 8致病因子,通过构建pSAK277-Zaofeng 8拟南芥、及枣过表达株系验证致病因子的功能,明确枣疯病植原体效应因子的致病表型,最终明确Zaofeng 8的致病表型。为枣疯病的发生机理与防治研究提供参考。筛选枣疯病植原体致病因子固然重要,但筛选与致病因子直接互作的枣蛋白以及验证编码与致病因子互作枣蛋白的基因功能也是阐明枣疯病致病机制的核心问题。本研究利用酵母双杂交技术筛选出与Zaofeng 8直接互作的枣Ⅱ类TCP转录因子家族成员。主要结果如下:(1)虫媒法转染拟南芥导致拟南芥出现小叶和矮化表型。利用生物信息学方法,从枣疯病植原体基因组中共筛选出8个定位在PMU上的枣疯病植原体假定效应因子,除Zaofeng3与SAP54相似外,其余7个为新致病因子,其中Zaofeng 8含有核定位信号,表明Zaofeng 8可能靶定寄主细胞核,干扰寄主基因的复制和转录。(2)采用蘸花法,将Zaofeng8基因转入拟南芥,检测了 9株拟南芥候选阳性苗,发现有4个株系为阳性苗,分别是株系2、株系5、株系6和株系9。对其进行各项生长指标测定,发现Zaofeng 8可导致拟南芥出现矮化和小叶的症状。(3)采用叶盘法将Zaofeng8基因转入枣,检测了 17株枣候选阳性苗,有3个株系为阳性苗,分别是株系2、株系10和株系16,对其生长情况进行观察,发现Zaofeng 8可导致枣出现矮化和小叶的症状。(4)构建了 Zaofeng8基因的GFP表达载体,做了 Zaofeng 8亚细胞定位图,证明Zaofeng 8定位到细胞核上。构建了发病枣cDNA酵母双杂交文库,为开展酵母文库杂交,筛选Zaofeng 8标靶蛋白打下基础。开展了 Zaofeng8和枣TCP转录因子的点对点酵母双杂检测,结果表明Zaofeng 8与枣中TCP20有互作关系。综上所述,致病因子Zaofeng 8是一个新的植原体致病因子,它能够和枣TCP转录因子互作,进而导致矮化、小叶、花器官发育不良等症状,研究的结果可以为抗病种质资源创制和枣疯病的防治提供参考。