【摘 要】
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本实验由伊氏锥虫云南水牛单克隆株YnTat1开始顺序感染5只兔,观察伊氏锥虫在兔体内的抗原变异情况,进一步揭示伊氏锥虫抗原变异规律。随后根据所获得的抗原变异体(VAT variable
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本实验由伊氏锥虫云南水牛单克隆株YnTat1开始顺序感染5只兔,观察伊氏锥虫在兔体内的抗原变异情况,进一步揭示伊氏锥虫抗原变异规律。随后根据所获得的抗原变异体(VAT variable antigen type),建立抗伊氏锥虫兔血清抗体库—原混血清库、虫体血清库、VSG(variable surface glycoprotein)血清库,并对抗体库的抗虫效果进行检测。 首先进行的是伊氏锥虫一个单克隆株在5只兔体内连续抗原变异的研究。用伊氏锥虫云南水牛单克隆株YnTat1感染兔,感染后30天内,每3天从兔血中分离锥虫并单虫克隆,最后一个未单虫克隆的虫株感染另一只兔,重复以上操作,这样顺序感染5只兔子,共获得50个单克隆锥虫种群(Tp),经间接免疫荧光和ABC酶标试验鉴定共为20个抗原性互不相同的抗原变异体(VATs)。用国际命名法命名为YnTat1.1、YnTat1.2、---YnTat1.20,从实验结果中未见这20个VATs在5只兔体内按照某种特定规律变异,但是其中有15个优势VATs在连续感染中多次重复,这印证了某些VATs倾向于在感染早期出现的规律(Gray 1965等)。我们分离到的VATs只有20个并且优势VATs多次重复,这说明在伊氏锥虫感染兔,波动的VATs局限在一定范围之内。其中三个克隆群体几乎与所有抗血清有交叉反应,推断它们为这一克隆株的“代表变体”。 随后进行的是抗伊氏锥虫兔血清抗体库抗虫效果检测试验,通过三种不同方法分别建立抗伊氏锥虫兔原混血清库、虫体血清库、VSG血清库,SD大白鼠分12组对三个抗体库的效果进行检测。结果表明抗伊氏锥虫兔原混血清库的抗虫效果最好,虫体血清库次之,VSG血清库与空白血清未见明显保护。
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