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目的:micro-RNA异常表达是导致宫颈癌的重要病因。课题组前期研究发现:与正常宫颈组织相比,宫颈上皮内瘤变及宫颈癌组织中mi R-375的表达水平明显下调。本实验旨在通过对宫颈癌细胞及正常上皮细胞mi R-375表达水平的检测,验证前期实验结果;通过干扰宫颈癌细胞mi R-375的表达,深入研究mi R-375对宫颈癌细胞增殖、凋亡及迁移能力的影响,初步判断mi R-375下游调控的靶基因,从而阐明mi R-375在宫颈癌发生发展中作用的可能分子机制。方法:(1)常规培养宫颈癌细胞株(Caski、C33A)及正常上皮细胞株(293T),并利用RT-PCR技术检测三种细胞中mi R-375的表达水平;(2)利用转染试剂si RNA MateTM将mi R-375模拟物或mi R-375抑制物片段转染入HPV16阳性的宫颈癌细胞Caski中,使mi R-375过表达或抑制表达,利用RT-PCR技术验证mi R-375的表达水平的变化;(3)利用CCK8、划痕实验及凋亡实验检测过表达或抑制表达mi R-375对宫颈癌细胞Caski增殖、迁移及凋亡等生物学行为的影响;(4)利用Western blot技术检测Caski细胞转染后下游靶基因IGF-1R表达水平的变化。结果:(1)293T细胞、Caski细胞、C33A细胞中mi R-375的相对表达量为分别为0.885±0.034,0.050±0.004,0.080±0.003。与正常上皮细胞相比,宫颈癌细胞中mi R-375的表达水平的表达均明显下降,差异有统计学意义(P<0.05);(2)Caski细胞转染后,mi R-375模拟物组中mi R-375的表达增加了约7.76倍,细胞增殖及迁移能力明显降低,细胞凋亡明显增加,IGF-1R蛋白表达降低至24.73%,与相应的阴性对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05);相反,mi R-375抑制物的转染使mi R-375的表达降低至14.39%,细胞增殖及迁移能力均明显增加,细胞凋亡均明显减少,IGF-1R蛋白表达增加了2.29倍,与相应的阴性对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。空白对照组与各阴性对照组之间差异均没有统计学意义(P>0.05)。结论:(1)与正常上皮细胞株相比,mi R-375的表达在宫颈癌Caski、C33A细胞中明显下调,说明mi R-375在宫颈癌中发挥抑癌作用;(2)在Caski细胞中,过表达mi R-375能够抑制细胞的增殖及迁移,促进细胞的凋亡,并可降低IGF-1R蛋白的表达;而mi R-375的表达减少能够促进细胞的增殖及迁移,抑制细胞凋亡,并增加IGF-1R蛋白的表达。说明mi R-375对宫颈癌细胞增殖、凋亡及迁移等生物学行为有一定的影响,并且可能是通过调控IGF-1R蛋白表达来发挥作用的。