高能X射线对肺癌骨转移细胞株SPC-A-1BM ERCC1表达的影响

来源 :青岛大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:tapril10
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:讨论高能X射线对肺癌骨转移细胞株SPC-A-1BM ERCC1蛋白表达的影响,揭示细胞株SPC-A-1BM对于铂类药物出现耐药性的时间点及建立动物模型后ERCC1蛋白表达情况。  方法:将人肺癌骨转移细胞株SPC-A-1BM培养后,取指数生长期的细胞分为试验组和对照组。将试验组用医用直线加速器6MV X射线照射,每次2Gy,1次/天,共计10Gy。照射完成后,每隔一周取指数生长部分细胞冷冻备用,对照组也取部分细胞冷冻,最后得到5份实验标本。用4%多聚甲醛固定2h,甘油封存,零下200C保存。用免疫组织化学SABC法检测ERCC1的表达情况。用鼠抗人ERCC1单抗试剂盒,根据试剂说明操作:经3%H2O2灭活过氧化物酶;微波抗原修复;滴加血清封闭液;加入鼠抗人ERCC1单抗试剂;滴加生物素二抗;滴加试剂SABC;用DAB显色,用苏木素复染,脱水,二甲苯透明,中性树脂封片。ERCC1阳性表现为细胞核内显示棕黄或棕红色颗粒沉淀,利用高倍显微镜视野计数100个细胞中阳性细胞表达的数目,每张片子不同位置重复5次。动物模型的建立是将对照组和高能射线照射10Gy组的细胞株培养后,取指数生长期的细胞制成悬浊液,用于各10只试验裸鼠的尾静脉接种。接种完成后,在SPF环境下饲养4周后,接受解剖观察裸鼠的成瘤情况。肿瘤组织由病理科制成组织蜡块。将病理切片后,经过脱蜡、水化;双氧水灭活过氧化物酶,蒸馏水反复洗涤后,微波抗原修复,PBS洗涤3次;滴加血清封闭液,室温温育30分,去除多余液体;加入鼠抗人ERCC1单抗试剂,4度冰箱内12h,用PBS液反复洗涤等处理;滴加生物素二抗,37℃,1h;用PBS反复洗涤3次,滴加试剂SABC,37℃,1h,再次PBS反复洗涤3次,DAB显色,苏木素复染,脱水,二甲苯透明,中性树脂封片。同样在高倍显微镜视野下计数100个细胞中阳性细胞表达的数目,每张片子不同位置重复5次。计量资料用均数±标准差((-)X±s)表示,采用SPSS19.0版软件处理数据,采用X2检验,以P<0.05为差异有统计学意义。  结果:对照组和实验组照射完成后1~4周不同时间点取得样本的ERCC1蛋白表达为(22.07±6.05%),(47.13±7.32%),(69.51±8.17%),(51.37±9.10%),(31.57±5.89%)。照射后1-3周的ERCC1蛋白表达与对照组比较有显著差异(P<0.05)。对照组试验裸鼠成瘤6只,实验组成瘤3只;实验组成瘤作用明显减弱。两组的病理切片样本ERCC1蛋白表达无显著差异(P>0.05)。  结论:人肺腺癌骨转移细胞株SPC-A-1BM在接受高能射线照射后1~3周内出现ERCC1的高表达,提示对铂类药物产生耐药性;细胞株SPC-A-1BM在受到高能X射线照射后用于接种裸鼠过程中,其生成肿瘤的能力减弱。
其他文献
提起花卉摄影,行家们无不称道微距镜头或具有近摄功能的长焦镜头。的确,“工欲善其事,必先利其器”,有微距镜头或长焦镜头自然会得心应手地拍到理想的效果,但我辈影友囊中羞
今年6月,冶金部召开了全国重点有色金属企业选矿会议。确定了有色金属选矿厂在今后三年的主要任务,即以挖潜、革新、改造为重点,以增产节约为中心,争取通过三年或稍多一点时
由于体育新闻报道在世界和平发展新时期中扮演了外交信使的角色,发挥了沟通人类美好心灵、消除敌意、增进友谊的作用,受到越来越广泛的重视与欢迎。体育成为人们社会生活中
(一)一台静电发生器供两台电选机用我厂用一台静电发生器产生的高压静电源供给两台也选机用,已连续运行近三年,情况良好。不但静电发生器发生故障时,主机可与另一台静电发生
目的:既往研究证实脑桥旁正中梗死(PPI)既可以是由动脉粥样硬化机制引起又可以是由小血管病变机制引起的。本研究目的是探讨不同类型PPI所具有的病因机制是否存在差异。同时
纪念今年的7月,中国共产党迎来了她的80岁生日,庆祝建党80周年也成了全国传媒的一项光荣的政治任务。东西南北中,长城内外,各大报刊一片红。其中,《北京青年报》地处政治中
页47 52 44 77 77 45 61 1031,土,工O自9自勺山门Q八JA︸一﹄口661皿q︺门了︸﹄J八曰注二口J只︸10 60 60 6263 23 28 40 57 59 60 60 60 60 61 23363 00 Od八0 4 4 4J吐︸4J任4 4A﹃月吮︸b
英古列茨采选公司从1975年8月开始采用MБ—70—23型磨矿机无减速机的传动装置(图1),它比原来带Ц2щ—1250型减速机传动费用少三分之二,其使用结果如下:带减速机无减速机事
背景100年前,Stubel发现了细胞和组织产生的自发荧光可以应用于疾病的诊断[1];Policard在1924年报道了关于肿瘤组织的自发荧光是来源于自发荧光基团的研究[2];50年前,有研究描述了嗜酸性粒细胞的自发荧光现象并且提出其应用于诊断和治疗的可能性[3,4]。然而,由于自发荧光具有荧光强度低、光谱复杂的难测性,限制了其研究的进展。最近,由于荧光显微镜,激光扫描共聚焦显微镜(confoca
目的:评价显微锁孔手术治疗高血压壳核性脑出血的疗效、安全性;探讨影响预后的因素。 方法:回顾性分析37例高血压壳核性脑出血的临床资料,采用Fisher精确概率检验、Kruskal