大多数芸薹属植物都具有自交不亲和的特性,这不仅能够增加异交率,防止自交衰退,同时也是杂种优势利用的重要手段。现在生产上利用的甘蓝型油菜是自交亲和的,而人工合成的油菜是自交不亲和的,说明油菜在进化过程中丢失了自交不亲和的功能。本实验室创建了自交不亲和系‘S-1300’,以它为基础,大多数甘蓝型油菜与其杂交后,F1表现亲和,称为显性自交亲和系;而少数材料与其杂交后,F1表现不亲和,称为隐性自交亲和系。本研究以自交不亲和系‘S-1300’和隐性自交亲和系‘230’、‘326’等材料,通过基因克隆、表达分析、遗传分析以及转基因互补实验等手段初步探究了‘230’、‘326’的自交亲和机制,主要结果如下:1、利用拟南芥模式植物研究II类SMI对II类SCR启动子的作用利用同源克隆法得到了油菜C基因组S6单倍型的SMI前体序列并转化拟南芥,同时分别克隆BnSCR-6和BnSCR-7的启动子,驱动GUS基因在拟南芥植株中表达,杂交获得双转基因植株,通过基因检测和GUS染色表明S6-SMI并不能引起BnSCR-6-GUS和BnSCR-7-GUS的失活,说明在拟南芥中来自甘蓝型油菜II类的SMI也许不能引起II类SCR启动子的失活。2、SCR基因的表达‘230’和‘326’虽然同属隐性自交亲和系(BnS-7BnS-7/BnS-6BnS-6),但是‘326’的SCR-6和SCR-7都不表达,而‘230’的SCR-6和SCR-7都表达,表明‘230’和‘326’的SCR受到了不同的表达调控。自交不亲和的‘S-1300’以及F1中,SCR-1300的表达量较高,表明高表达的SCR-1300对自交不亲和性的维持很重要。3、‘230’和‘326’的亲和性遗传分析鉴定自交不亲和系‘S-1300’和隐性自交亲和系‘230’和‘326’的单倍型组成,发现它们的C基因组单倍型都为BnS-6,只有A基因组不同;‘S-1300’ב230’,‘S-1300’ב326’配置的分离群体基因型和表型基本一致,但在‘326’的BC1群体中发现了基因型和表型不一致的植株,说明除S位点外可能存在其他调控因子共同决定着自交不亲和的表型。4、转基因T-DNA侧翼序列分析通过Tail分析发现转基因Z326-1的T1代植株的T-DNA插入位于GSBRNA2T0017974001第二个外显子,都为转基因杂合植株,从而推测转基因杂合的花粉能够穿过柱头,而转基因纯合的植株才会表现出自交不亲和的表型。