论文部分内容阅读
目的通过建立大鼠体外循环(CPB)模型,探讨单唾液酸神经节苷脂（GM-1）对CPB脑损伤的影响及其作用机制。方法成年雄性SD大鼠27只，体重350-450g，采取抽签法随机分为3组，每组9只，分别为空白对照组（阴性对照组，S组）、CPB对照组（阳性对照组，B组）、GM-1干预组（实验组，C组）。采用右颈静脉腔房引流，右颈动脉灌注建立大鼠体外循环模型。S组模仿体外循环过程，仅在各部位插管，但不转流，予以机械通气60min；B组转流液中含有等量生理盐水，体外循环时间为60min；C组转流液中加入单唾液酸神经节苷脂(GM-1)20mg/kg。S组机械通气后3h时断头取脑组织标本，B组和C组CPB结束后3小时断头取脑组织标本，行透射电镜观察皮层、海马超微结构变化；免疫组化法检测p-ERK1/2、BAX和BCL-2蛋白的表达；TUNEL法标记神经细胞凋亡数；Western-blot法检测P-ERK1/2、BAX和BCL-2蛋白的活性。结果B组和C组转流中平均动脉压、心率、PaO2、PaCO2、红细胞比积差异无统计学意义(P>0.05)。在透视电镜下，B组大脑皮层和海马细胞核膜模糊，核内异染色质凝聚、边集，细胞器有减少或出现空泡化；血管内皮细胞胞膜局部模糊，细胞间紧密连接相对松散。C组超微结构的改变较之明显减轻。免疫组化显示，与S组比较，进行CPB的B组和C组大脑皮层及海马神经元细胞的ERK1/2(p-ERK1/2)活性、BAX／BCL-2比值及凋亡的神经细胞数目增多，且有统计学意义(P<0.05)；与B组比较，C组ERK1/2(p-ERK1/2)活性、BAX/BCL-2比值及凋亡的神经细胞数目均减少且有统计学意义(P<0.05)。Western-blot显示，与S组比较，进行CPB的B组和C组ERK1/2(p-ERK1/2)、BAX及BCL-2蛋白表达均增高，且差异有统计学意义(P<0.05)。与B组比较，C组ERK1/2(p-ERK1/2)和BAX蛋白表达均降低，BCL-2蛋白表达增高，且差异有统计学意义(P<0.05)。结论：1、体外循环脑损伤中，海马神经元细胞损伤重于皮层，且与神经细胞凋亡有关。2、单唾液酸神经节苷脂对体外循环脑损伤具有保护作用，其机制可能与抑制ERK1/2通路的激活，调节BAX和BCL-2蛋白的表达，减轻细胞凋亡有关。