研究目的：　　前期研究已经证明了UCA1促进胰腺癌细胞的迁移和侵袭。本研究旨在探讨UCA1对人胰腺癌细胞迁移和侵袭能力生物学行为存在的分子调节机制，为UCA1应用于胰腺癌的分子靶向治疗提供充足的理论依据。　　研究方法：　　1. 设计并构建干扰质粒 sh-UCA1，将干扰质粒 sh-UCA1 转入相对高表达UCA1的BxPC-3和SW1990细胞，将过表达质粒UCA1转入相对低表达UCA1的PaTu8988和PANC-1细胞，通过Western blot法验证Hippo信号通路中蛋白的表达情况，荧光定量PCR法检测UCA1和YAP的 mRNA表达水平。　　2. 购买pSL-MS2-12X和pMS2-GFP质粒，构建pSL-MS2-12X-UCA1质粒，并转染上述质粒到293T细胞中，通过RNA免疫共沉淀法（RIP）检测UCA1与Hippo 信号通路中的蛋白结合情况。购买 pSL-MS2-12X-UCA1 5’和pSL-MS2-12X-UCA1 3’质粒，再通过 RIP 法检测 Hippo 信号通路中的蛋白与UCA1结合的部位。构建UCA1突变体质粒，再次通过RIP法验证前面实验的结论。　　3. 将质粒 UCA1-wt 和 UCA1-mut 转入相对低表达 UCA1 的 PaTu8988 和PANC-1细胞，通过Western blot法验证Hippo信号通路中蛋白的表达情况，核浆分离和免疫荧光技术检测 YAP 的核质分布情况，荧光素酶报告基因系统检测YAP的转录活性。　　研究结果：　　1. 成功构建sh-UCA1干扰质粒。下调UCA1后，Western blot结果表明胰腺癌细胞中 MOB1 和 YAP 表达降低，MST1、MST2、p-MOB1、p-Lats1、Lats1和p-YAP表达增高；荧光定量PCR结果表明UCA1和YAP mRNA的表达水平降低。上调UCA1后，MOB1和YAP表达增高，MST1、MST2、p-MOB1、p-Lats1、Lats1和p-YAP表达水平下降；荧光定量PCR结果表明UCA1和YAP mRNA的表达水平升高。　　2. 成功构建pSL-MS2-12X-UCA1和UCA1突变体质粒。RNA免疫共沉淀法证明UCA1和Hippo信号通路中MOB1、Lats1和YAP结合，并且主要是UCA1 5’段和MOB1、Lats1和YAP结合，UCA1 5’突变后上述结合现象消失。　　3. UCA1-wt或UCA1-mut瞬时转染PaTu8988和PANC1细胞株后，Western blot结果表明UCA1-wt组MOB1和YAP表达增高，MST1、MST2、p-MOB1、Lats1、p-Lats1和p-YAP表达水平下降；UCA1-mut组和对照组比较无明显变化，并且表现出与UCA1-wt 组相反的结果。核浆分离和免疫荧光结果都表明 UCA1促进了YAP从细胞质向细胞核转移。荧光素酶报告基因检测系统结果说明YAP转录活性升高。　　研究结论：　　UCA1通过Hippo信号通路促进胰腺癌细胞的迁移和侵袭，UCA1与Hippo通路中的MOB1、Lats1和YAP结合形成“屏蔽复合物”，维持YAP活性，促进YAP核转位，从而促进胰腺癌细胞的迁移和侵袭。