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猪肉是人类重要的肉食品之一,此外,相比大鼠和小鼠,猪在遗传、解剖、生理代谢和疾病特征上与人更为相似,且相比灵长类动物,猪的伦理方面的争议较少,因此猪是人类生物医学研究的理想动物模型。本实验室前期获得了一批转基因克隆猪,其中一头祖代公猪因外源基因插入12号染色体(SSC12)的NAGLU基因第六个外显子(exon 6),破坏了该基因的开放阅读框。在人上该基因的功能丧失性突变会导致粘多糖贮积症ⅢB型(MPS ⅢB)疾病。本研究以该祖代猪的F1后代及F1代MPS ⅢB公猪和MPS ⅢB母猪的半同胞交配所获得F2个体为研究对象,对因外源基因插入而导致的MPS ⅢB猪进行系统的表型鉴定,为人类MPS ⅢB疾病研究提供借鉴。本研究首先利用常规PCR、多重PCR、相对荧光定量PCR和绝对荧光定量PCR对45头F2个体及45和28日龄胚胎开展纯合子鉴定,均未检测到NAGLU-/-纯合子个体,推测纯合子个体在胚胎期死亡。针对3头180日龄F1代MPS ⅢB患病猪(NAGLU+/-)和1头正常猪开展核磁共振扫描、CT扫描和X射线扫描分析。核磁共振及CT扫描均发现患病个体存在不同程度的脑萎缩,核磁共振分析还揭示大脑内囊区异常、顶额叶和丘脑异常、脑室扩张、小脑萎缩等症状,四肢X射线扫描并未见明显的病理改变。针对3头2.5岁MPS ⅢB猪的大脑和肝脏开展免疫组化分析,发现患病个体的NAGLU含量明显低于阴性个体,且患病个体存在明显的组织病变。本研究中的NAGLU+/-猪表现出与人类MPS ⅢB疾病相似的病理特征,表明该患病猪群是理想的MPS ⅢB疾病模型猪。