雌二醇对血管紧张素Ⅱ诱导去卵巢小鼠肾脏重构的影响

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目的:研究雌二醇在血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)诱导去卵巢(Ovarietomy,OVX)小鼠肾脏重构和氧化应激的作用。方法:1、将8周龄的SPF级C57BL/6雌性小鼠61只,随机分为9组,分别为(1)空白组(n=6)、(2)假手术(Sham)组(n=6)、(3)空白组+油组(n=6)、(4)OVX组(n=6)、(5)Sham+AngⅡ组(n=6)、(6)OVX+AngⅡ组(n=8)、(7)Sham+AngⅡ+E2组(n=7)、(8)OVX+AngⅡ+E2组(n=8)、(9)OVX+AngⅡ+缬沙坦(代文)组(n=7),其中(7)(8)组手术后第二天开始每天皮下给予雌二醇(200ug/kg)油溶液,(4)组皮下给予相同剂量橄榄油;术后2周,(5)(6)(7)(8)(9)组皮下植入装有AngⅡ[1000ng/(kg·min)]溶液微量渗透泵;植入微量泵后1天,(9)组缬沙坦(20.8mg/kg)悬浮液,共四周。2、用无创血压计测量各组0周、2周末、4周末、6周末小鼠血压。3、6周末处死小鼠取血清,用黄嘌呤氧化酶法测小鼠血清超氧化物歧化酶(SOD),硫代巴比妥酸(TBA)法测小鼠血清丙二醛(MDA)。4、HE染色和Masson染色:观察肾小管管型面积比、肾脏血管周围胶原纤维面积(PVCA)/血管腔面积(VLA)比值。5、免疫组化检测小鼠肾脏转化生长因子β1(TGF-β1)、NOX2、NOX4的表达量。结果:1、OVX组分别与空白组、Sham组、空白+油组比,OVX组的6周末SBP、肾脏间质血管PVCA/VAL、血清MDA均明显升高(P均<0.05),血清SOD均明显降低(P均<0.05)。2、加入AngⅡ后,Sham+AngⅡ组VS Sham组、OVX+AngⅡ组VS OVX组示4和6周末SBP、肾小管管型面积比、肾脏间质血管PVCA/VAL、血清MDA、TGF-β1、NOX2、NOX4表达明显升高(P均<0.01),血清SOD明显降低(P均<0.01)。3、去卵巢加入AngⅡ后,OVX+AngⅡ组VS Sham+AngⅡ组示4和6周末SBP、肾脏间质血管PVCA/VAL、血清MDA、肾TGF-β1、NOX2表达明显升高(P均<0.05),血清SOD明显降低(P<0.05)。4、与Sham+AngⅡ组比,Sham+AngⅡ+E2组的肾小管管型面积比明显减少(P<0.01),但2周末、4周末和6周末SBP、肾间质血管PVCA/VAL、血清MDA、血清SOD、肾脏TGF-β1、NOX2、NOX4表达差异均无统计学意义(P均>0.05)。5、分别与OVX+AngⅡ组比较:OVX+AngⅡ+E2组和OVX+AngⅡ+代文组的4周末和6周末SBP、肾小管管型面积比、肾间质血管PVCA/VAL、血清MDA、肾脏TGF-β1蛋白、NOX2蛋白、NOX4蛋白表达明显减少(P<0.01),血清SOD明显升高(P均<0.05)。OVX+AngⅡ+E2组与OVX+AngⅡ+缬沙坦组相比:OVX+AngⅡ+缬沙坦组较OVX+AngⅡ+E2组的4周末和6周末SBP、肾小管管型面积比、肾间质血管PVCA/VAL、肾脏TGF-β1蛋白、NOX2蛋白表达明显降低(P<0.05),血清SOD、血清MDA、肾NOX4蛋白无统计学差异。结论:1、去卵巢对小鼠血压、肾脏重构及氧化应激有一定促进作用2、E2对AngⅡ升高去卵巢小鼠血压、促进肾脏重构及氧化应激有一定抑制作用,但降压和抑制重构作用不如缬沙坦。3、E2、缬沙坦可能通过NOX2/NOX4途径发挥抗氧化作用。
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