【摘 要】
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油茶（Camellia oleifera）是我国南方重要的木本油料树种,经济价值高。近年来,我国大力推广油茶产业,但存在优良种质供不应求的现象。目前,油茶主要采用嫁接、扦插等技术繁育种苗,生长周期长,易受环境制约,无法满足油茶苗木繁育的供给需求。利用植物组织培养技术,能在短时间内繁育大量优质苗木,且合适的辐照光源能有效提高试管苗的增殖系数,生根率和移栽成活率。本试验以油茶‘华金’带芽茎段为外植体,
【基金项目】
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湖南省林业厅项目（XKL201743）
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油茶（Camellia oleifera）是我国南方重要的木本油料树种,经济价值高。近年来,我国大力推广油茶产业,但存在优良种质供不应求的现象。目前,油茶主要采用嫁接、扦插等技术繁育种苗,生长周期长,易受环境制约,无法满足油茶苗木繁育的供给需求。利用植物组织培养技术,能在短时间内繁育大量优质苗木,且合适的辐照光源能有效提高试管苗的增殖系数,生根率和移栽成活率。本试验以油茶‘华金’带芽茎段为外植体,通过双因素三水平试验优化消毒方法,采用正交设计试验筛选基本培养基以及植物生长调节剂的最适浓度,并在建立离体快繁体系基础上,研究不同光质对‘华金’试管苗增殖壮苗生根的影响,旨在优化主要化学影响因素培养基,建立‘华金’组织培养体系的基础上,优化主要物理影响因子光质,从而进一步提高油茶组织培养的增殖成苗率,为其工厂化育苗提供科学依据,促进油茶优良品种的推广。主要研究结果如下:1.建立‘华金’油茶组织培养体系,明确消毒方法以及各培养阶段的最适宜培养基。‘华金’带芽茎段最适宜的消毒方法为75%酒精处理30s后,0.1%升汞处理10min,存活率为66.39%,高于其他处理方式。正交试验结果表明,外植体最适宜诱导出芽培养基为1/2MS+2.0mg·L-16-BA+0.05 mg·L-1NAA+30g·L-1蔗糖+7g·L-1 琼脂,最适宜增殖培养基为 MS+4.0 mg·L-16-BA+0.01 mg·L-1BA+30g·L-1 蔗糖+7g·L-1琼脂,最佳生根方法为无根试管苗在1.0 mg·mL-1IBA中浸泡30s后,继续在不添加生长调节剂的1/2MS+15g·L-1蔗糖+7g·L-1琼脂培养基上培养20-30d,经过炼苗后移栽,最佳基质成分配比为泥炭:蛭石（1:1）,成活率为66.67%。2.在‘华金’增殖培养阶段,不同光质对‘华金’生理生化反应以及叶片细胞变化产生差异性影响。红蓝（4:1）辐照光源下培养30d试管苗的增殖系数为7.33,60d增殖系数为10.1,均显著高于其他处理组,是对照组的1.5倍。红蓝（4:1）光质下试管苗鲜重显著高于其他试验组,干重仅次于蓝光处理组,叶绿素含量仅次于对照组,可溶性糖含量仅次于蓝光处理组,可溶性蛋白含量显著高于其他试验组,抗氧化酶POD、SOD、CAT活性均略高于对照组,但是Rubisco酶活性仅高于红蓝（1:4）光源处理组。红蓝（4:1）辐照光源下试管苗叶片气孔面积显著低于其他试验组,但是密度最高,叶片细胞结构紧密整齐,栅栏组织和海绵组织均显著厚于其他试验组,综合各指标数据,红蓝（4:1）光质比最有利‘华金’试管苗增殖培养。3.不同光质条件下‘华金’壮苗培养结果也存在显著性差异。虽然红蓝（4:1）辐照光源下壮苗,苗高显著矮于红光处理组,但是与对照组没有显著差异;茎粗1.44±0.07mm,显著粗于其他试验组,而红光处理组苗茎显著细于其他试验组。红蓝（4:1）光质下壮苗培养,试管苗健壮,叶片嫩绿,有利于下一步生根培养。比较光质调控下增殖壮苗所获试管苗与对照组试管苗在相同条件下生根情况,结果显示红蓝（4:1）辐照光源下试管苗生根率为81.67%,约为对照处理的1.2倍,生根试管苗移栽至成分配比为泥炭:蛭石（1:1）的基质上,成活率为86.67%,约为对照处理的1.3倍。各培养阶段数据综合计算结果显示,在红蓝（4:1）光质下增殖继代2次并壮苗后获得的‘华金’油茶无菌苗数量是仅优化培养基组织培养体系下获得的1.5倍。
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