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本试验在以往研究的基础上，添加新型的冷冻保护剂—纳米化红景天多糖(Nonomaterials Rhodiola Sachanensis Polysaccharide,NRSP)，探索其对猪精液冷冻保护的效果，以及添加的最适浓度，初步探讨了纳米化红景天多糖的冷冻保护机制及对冷冻程序进行优化，以期提高猪精液冷冻效率，为该技术的成熟应用提供理论参考。研究结果如下：1、在冷冻稀释液中分别添加体积分数为1%、5%、10%、15%、20%浓度的纳米化红景天多糖，以添加6mg/L浓度的红景天多糖为实验对照组，无添加组为空白对照组。冷冻-解冻后，检测精液质量，结果表明体积分数为15%的纳米化红景天多糖添加组精子质量最好，活力、顶体完整率、质膜完整率分别为0.69、51.42%、25.95%均显著高于其他组(P＜0.05)，A型精子百分率最高，精子活率为96%，显著高于其它组(P＜0.05)；在冷冻稀释液中添加红景天多糖及纳米化红景天多糖，冷冻-解冻后精液中SOD含量上升，添加20%体积分数的纳米化红景天多糖组的SOD含量最高，为343.05mgprot，显著高于空白对照组(P＜0.05)，添加15%体积分数纳米化红景天多糖和6mg/L红景天多糖组冷冻-解冻后精液MDA含量最低，分别为11.60nmol/ml、10.83nmol/ml，显著低于其他添加组及空白对照组(P＜0.05)；2、添加15%体积分数纳米化红景天多糖与不同浓度甘油配伍，结果表明，当甘油添加终浓度为3%时，精子活力、顶体完整率、质膜完整率、活率均显著高于无甘油组及2%终浓度的甘油配伍组(P＜0.05)，且2%终浓度甘油添加组的精子冷冻效果明显优于无甘油添加组(P＜0.05)；添加15%体积分数纳米化红景天多糖与不同浓度卵黄相配伍，当卵黄添加浓度为20%和30%时，冷冻-解冻后精子活力、顶体完整率、质膜完整率显著高于10%浓度卵黄添加组(P＜0.05)，但20%卵黄添加浓度和30%卵黄添加浓度在精子顶体完整率和质膜完整率方面没有显著差异(P＞0.05)；3、选取5个不同的冷冻高度（1cm、3cm、5cm、7cm、9cm）分别冷冻猪精液，检测冷冻-解冻后精子活力、顶体完整率、质膜完整率及不同运动状态的精子，结果发现，3cm组冷冻-解冻后精子活力、顶体完整率、质膜完整率最高，并显著高于其他冷冻高度(P＜0.05)，其中1cm和9cm冷冻高度组精子活力低于0.3，不适合用于猪精液冷冻保存中。3cm组解冻后A型精子比例最高，说明冷冻高度为3cm时，解冻后精子运动状态最好；精子预平衡过程中常温平衡及17℃平衡，冷冻-解冻后精子活力及膜结构完整率均无显著差异(P＞0.05)；测试了冷冻过程中精液过滤后、17℃平衡后、添加冷冻Ⅰ液平衡后、添加冷冻Ⅱ液平衡后及冷冻-解冻后精液pH、活率及畸形率，发现冷冻前各步骤之间均无显著差异(P＞0.05)，解冻后精液质量迅速下降，且差异显著(P＜0.05)；4、比较了不同解冻温度和解冻时间对精子质量的影响，结果表明，52℃9s解冻组解冻后精子质量最好，精子活力、顶体完整率、质膜完整率显著高于其他解冻组(P＜0.05)，且同一温度下不同解冻时间之间精子质量差异显著(P＞0.05)；解冻液中添加不同浓度红景天多糖及纳米化红景天多糖，平衡相同时间后，15%体积分数的纳米化红景天多糖添加组和2mg/L红景天多糖添加组活力最好，但未见明显优势(P＞0.05)，解冻液中添加15%体积分数的纳米化红景天多糖解冻后精子顶体完整率和质膜完整率显著好于其他添加组(P＜0.05)；选择15%体积分数的纳米化红景天多糖与卵黄配伍，解冻后与单独添加纳米化红景天多糖组相比精子质量下降，且差异显著(P＜0.05)。本试验在冷冻-解冻液中添加纳米化红景天多糖，取得较好的冷冻保护效果及抗氧化效果，并优化了冷冻-解冻程序，为猪精液冷冻保护的研究提供理论参考。