【摘 要】
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捻转血矛线虫是对反刍动物影响最大的一种消化道线虫,捻转血矛线虫耐药性的产生,严重威胁着畜牧业的发展。为了筛选捻转血矛线虫丙硫咪唑耐药性相关基因用于耐药性产生机制研
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捻转血矛线虫是对反刍动物影响最大的一种消化道线虫,捻转血矛线虫耐药性的产生,严重威胁着畜牧业的发展。为了筛选捻转血矛线虫丙硫咪唑耐药性相关基因用于耐药性产生机制研究和临床耐药虫株鉴定,本研究基于转录组数据,得到捻转血矛线虫丙硫咪唑敏感株和耐药株SNP信息,进行了功能富集分析,筛选出4个差异基因,对其进行生物信息学分析及PCR测序验证;对采自内蒙古乌审旗、察右后旗和科右前旗的丙硫咪唑耐药种群Ⅰ型β-tubulin基因167、198和200位点单核苷酸多态性位点进行了检测;对捻转血矛线虫耐丙硫咪唑虫株不同药物浓度刺激下P450、GST和ABC基因表达量进行了检测。研究结果如下:（1）捻转血矛线虫HC-WSrBZ1、HC-WSrBZ2共有6090个差异基因富集到50条GO Term上,KEGG pathway共筛选出11条显著富集通路。Hc-CYsBZ和Hc-CYrBZ共有6757个差异基因富集到50条GO Term上,KEGG pathway共筛选出19条显著富集通路。Hc-ssBZ、Hc-XArBZ共有208个差异基因富集到26条GO Term上,KEGG pathway共筛选出10条显著富集通路。筛选出的 4 个差异基因 HCON00192020、HCON00037800、HCON00129090和HCON00178650在捻转血矛线虫耐丙硫咪唑虫株和敏感虫株间有明确差异,可作为耐药性分子标记。（2）对内蒙古乌审旗、察右后旗和科右前旗3个地区捻转血矛线虫丙硫咪唑耐药种群Ⅰ型β-tubulin基因的检测,发现167位点均未发生突变,而198和200位点有突变,总体上198位点突变频率高于200位点。3个地区发现4种基因型,分别是198纯合耐药型及200纯合敏感型、198纯合敏感型及200纯合耐药型、198纯合敏感型及200杂合耐药型和198及200均杂合耐药型。（3）经荧光定量PCR检测,在不同药物浓度刺激下,P450、GST和ABC 3个基因的表达量差异均显著,初步证明与耐药性相关。
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