论文部分内容阅读
缺氧是肿瘤微环境区别于正常组织的一个基本特征,会导致血管再生、肿瘤恶化和转移,对大多数抗肿瘤治疗有着抑制作用。因此本文设计了两种多功能性的血红蛋白类人工氧载体,促进氧气和药物的高效运输,协同肿瘤缺氧环境的改善和药物治疗的效果。一、pH响应型血红蛋白类纳米氧载体利用可逆加成-链转移(RAFT)聚合制备两嵌段共聚物聚甲基丙烯酸-b-聚甲基丙烯酸丁酯(PMAA-b-PBMA),随后共价偶联上血红蛋白(Hb),得到Hb-PMAA-b-PBMA。利用紫外分光光度计证明了该纳米氧载体保持了 Hb的氧化还原活性,且具有良好的氧气结合能力。通过对比该纳米氧载体在不同pH条件下的生理形态和药物释放行为,证实了该氧载体具有pH响应性,有望实现药物在肿瘤部位可控的快速释放。同时体外细胞实验表明该载体具有生物相容性,且相对于游离阿霉素(DOX),DOX-eco-Hb-PMAA-b-PBMA的肿瘤细胞毒性显著增加。二、具有肿瘤主动靶向性的pH响应型血红蛋白类纳米氧载体(HCMs)利用RAFT聚合制备两亲性聚合物聚(2-甲基丙烯酰胺基吡喃葡萄糖)-b-聚甲基丙烯酸-b-聚甲基丙烯酸丁酯(PMAG-b-PMAA-b-PBMA),随后共价偶联上Hb,得到HCMs。利用紫外分光光度计证明了该纳米载体保持了 Hb的氧化还原活性,具备良好的氧气结合能力,并且纳米载体胶束结构提高了血红蛋白的抗氧化性能。该纳米氧载体利用静电结合作用负载抗肿瘤药物DOX形成载药量为19%的载药胶束,通过研究该载药胶束在不同pH缓冲溶液中的药物释放行为,证实了该载体的pH响应性。体外细胞实验同时表明该载体具有生物相容性,且相对于游离DOX,DOX-eco-HCMs的肿瘤细胞毒性显著增加。利用激光共聚焦以及流式细胞仪对比了该纳米氧载体对正常细胞Hek 293和肿瘤细胞Hela的亲和力,实验结果表明该纳米氧载体能够主动靶向肿瘤细胞。因此,本文设计的多手段结合、多功能响应的氧载体在肿瘤治疗中具有潜在的应用。