【摘 要】
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该研究依据N,L6,RPS2等NBS类抗病基因的NBS保守区设计简并性引物扩增棉花基因组DNA,在517bp左右获得特异性扩增条带.回收PCR产物,连接转化共得到800个克隆.经酶切筛选、嵌套
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该研究依据N,L6,RPS2等NBS类抗病基因的NBS保守区设计简并性引物扩增棉花基因组DNA,在517bp左右获得特异性扩增条带.回收PCR产物,连接转化共得到800个克隆.经酶切筛选、嵌套引物鉴定获得252个候选RGA克隆.该研究所获得的RGA与大豆、棉花、腰豆等作物中已经克隆的NBS类RGA的核苷酸序列有很高的相似性.其中8条可通读的RGA序列推导出的氨基酸序列同已知抗病基因L6、RPM1、SRPS2、N表现出从25﹪-58﹪的相似性.该研究以海陆杂交F2群体作为定位群体,应用RFLP方法将获得的7条RGA序列定位在棉花基因组中.海岛棉RGA的获得、在基因组的定位,对于棉花NBS类R基因的起源和进化,利用分子标记辅助育种以及棉花抗病基因的克隆,提供了重要的背景.
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