[目的]本论文为“高附加值农产品真伪鉴别和质量控制”项目:以2015版《中国药典》收载的铁皮石斛为重点研究对象,选取其它九种石斛(流苏石斛、金钗石斛、鼓槌石斛、紫皮石斛、球花石斛、苞鞘石斛、兜唇石斛、束花石斛和叠鞘石斛),采用薄层色谱法、HPLC-PDA、紫外-可见分光光度法、氨基酸自动分析仪、ICP-MS等现代分析技术,以期准确、高效对不同品种石斛进行鉴别研究与质量评价。[方法]1.薄层色谱鉴别:参照《中国药典》薄层鉴别方法,对十种石斛药材不同极性部位(石油醚、乙酸乙酯、正丁醇)薄层色谱进行系统研究。2.采用HPLC-PDA技术,建立HPLC指纹图谱,对八种石斛药材指纹图谱进行对比和相似度计算,结合聚类分析、主成分分析对石斛做鉴别研究。3.采用HPLC-PDA技术,建立东崑宕内酯、滨蒿内酯、香豆素、柚皮素、芹菜素、石斛酚、毛兰素和石斛碱八种成分分析测定方法并进行含量测定;采用紫外-可见分光光度计,通过苯酚-硫酸法测定十种石斛多糖含量;采用氨基酸分析仪测定十种石斛17种水解氨基酸含量;以十种化学成分含量差异结合方差分析、t检验对石斛做质量评价。4.采用ICP-MS技术,测定十种石斛稀土元素和微量元素含量。[结果]1.根据薄层色谱斑点特征,十个品种石斛之间既有相同斑点,各自又有特殊的斑点,结果显示不同品种石斛之间的化学成分存在差异。2.高效液相指纹图谱13批铁皮石斛相似度为0.791-0.929;8批不同品种石斛相似度介于0.169-0.875之间,标出共有峰23个,经对照品指认出六个峰,分别为香草酸,丁香酸,对羟基苯甲醛,东崑宕内酯,阿魏酸,柚皮素,同时对球花石斛16个化学成分色谱峰进行了标示。结合聚类分析和主成分分析,63批石斛样品可快速被分为两大类,然后60批石斛样品又进一步被分为四类。三种分析方法综合运用,验证了化学模式识别用于品种鉴定和归类的可行性。3.含量测定及方差分析、t检验结果表明,十种石斛的东崑宕内酯、滨蒿内酯、香豆素、柚皮素、芹菜素、石斛酚、毛兰素、石斛碱、多糖和氨基酸含量存在差异(P<0.05)。石斛酚、毛兰素、石斛碱可以分别作为含量测定指标对流苏石斛、鼓槌石斛、金钗石斛进行质量控制。香豆素可以作为含量测定参考指标进行叠鞘石斛质量控制,柚皮素、芹菜素可以作为含量测定参考指标进行球花石斛质量控制。实验建立的石斛属中东崑宕内酯、滨蒿内酯定量分析方法可为质量控制提供参考依据。多糖含量、17种氨基酸总含量可以作为评价指标对铁皮石斛和紫皮石斛进行质量控制,同时可以作为兜唇石斛质量控制的参考依据。17种氨基酸总含量也可作为束花石斛质量控制的参考依据。4.文山、德宏、弥勒和腾冲四个产地的11批铁皮石斛之间稀土元素总含量存在差异。德宏产八个品种石斛稀土元素总含量无明显差异,但同一产地的不同种石斛16种稀土元素含量存在差异。四个产地的11批铁皮石斛铬(Cr)元素、镍(Ni)元素和锌(Zn)元素含量存在差异。德宏产八个品种石斛铬(Cr)、镍(Ni)、锌(Zn)、硒(Se)四种元素含量丰富,而锡(Sn)元素只在金钗石斛和苞鞘石斛中有检出,并且八种石斛之间铬(Cr)、镍(Ni)、锌(Zn)三种元素含量存在差异。18批石斛重金属铜(Cu)、镉(Cd)、汞(Hg)、铅(Pb)四种元素均在限量范围内,德宏产球花石斛、铁皮石斛和苞鞘石斛各1批重金属砷(As)元素有明显的超标现象。[结论]十个品种石斛内在的化学成分无论在种类还是含量上都存在差异,薄层色谱、HPLC指纹图谱能够对十种石斛做出鉴别,多成分分析在一定程度上能够反映石斛的质量,可以为石斛的鉴别和质量控制提供参考。石斛中16种稀土元素、人体必需5种微量元素和五种有害重金属元素含量测定,为石斛营养保健价值和某些药效方面评价,以及评价不同产地石斛药用质量安全提供必要的科学依据。