目的：用DNA微阵列基因芯片对湖南地区2012年非结核分枝杆菌(NTM)临床分离株进行菌种鉴定,并分析其耐药性。方法：1.收集2012年湖南地区经结核培养阳性的3157例标本,经对硝基苯甲酸(PNB)／噻吩-2-羧酸肼(TCH)鉴别培养基培养,初步鉴定出271例NTM分离株。2.将初步分离的271例NTM分离株用DNA微阵列基因芯片法进一步进行分枝杆菌菌种鉴定。3.将分离到的225株NTM采用绝对浓度法对其进行抗结核药物敏感性测试,以了解湖南地区NTM的耐药情况。结果：1.湖南地区3157株结核阳性样本经PNB/TCH初步鉴定,其中271例为NTM。对这271例样本用DNA微阵列基因芯片进一步鉴定,其中结核分枝杆菌(MTB)46株(16.9%),NTM225株(83.1%),NTM的分离率为7.1%。2.DNA微阵列基因芯片检测的225株NTM中,鸟分枝杆菌63株(28%)、胞内分枝杆菌90株(40%)、偶然分枝杆菌9株(4%)、龟或脓肿分枝杆菌54株(24%)、戈登分枝杆菌3株(1.33%)、瘰疬分枝杆菌3株(1.33%)、堪萨斯分枝杆菌3株(1.33%)。3.绝对浓度法检测225株NTM耐药性结果显示大多数NTM对抗结核药物呈现高度耐药。结论：1.传统的PNB/TCH生长试验鉴定NTM特异性低；采用DNA微阵列基因芯片技术鉴定NTM快速(6小时左右)、准确；2.首次报道湖南地区2012年NTM分离率为7.1%,以鸟分枝杆菌、胞内分枝杆菌和龟或脓肿分枝杆菌为主；3.NTM对常规抗结核药呈现高度耐药,如果已经鉴定为NTM,可不必进行常规结核药敏试验。