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卵巢癌(ovarian cancer OC)是女性生殖系统最常见的三大恶性肿瘤之一,发病率位居第三位,死亡率却居第一位,在卵巢恶性肿瘤中,其中上皮性卵巢癌是最常见的卵巢恶性肿瘤,因为初期的生物分子诊断标志物和特异性的临床表现不足,所以早期病变不容易察觉,发现时已经是晚期。尽管早期积极接受肿瘤细胞减灭术后给予铂类加紫杉醇(TP)联合化疗被称为卵巢癌的一线治疗方案,该方案虽然使得卵巢癌得到一定的临床缓解,但化疗耐药性和术后易复发性使卵巢癌的死亡率位于妇科恶性肿瘤首位,成为威胁女性生命和健康的严重的恶性肿瘤,因此探讨卵巢癌的发病机制、早期分子生物学检验指标一直是国内外妇科肿瘤的关注热点。上皮间质转化(Epithelial mesenchymal transition EMT)是上皮细胞转化为间质细胞,从而取得间质细胞特质的进程,参与了胚胎发育、组织修复、伤口愈合和肿瘤发生转移等进程中。E-cadherin是EMT过程中重要的上皮细胞转录抑制因子,是一种钙依赖的跨膜糖蛋白,E-cadherin的主要作用是介导同质细胞间的黏附反应,它主要表达于细胞膜。锌指结构蛋白超家族Slug,又称为Snail2,由一个具有锌指结构域的高度保守C-末端的羟基和一个N-端的氨基末端组成,Slug与E-cadherin启动元件E-box联合,Slug是E-cadherin启动子的控制因子,经过特异性的抑制上皮细胞表型成分E-cadherin从而减小细胞间的黏附力,是调整E-cadherin转录的直接抑制因子。目的目前尚未见Slug与E-cadherin在上皮性卵巢癌中两者联合表达的报道,本研究拟通过免疫组化SP法和荧光定量反转录聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测Slug与E-cadherin在不同卵巢组织中的蛋白阳性表达率及mRNA的表达情况,分析在上皮性卵巢癌组织中两个因子的蛋白阳性表达率与不同临床病理特征的关系,并分析二者之间在上皮性卵巢癌组织中m RNA相对表达量的相关性,从而讨论Slug及E-cadherin在卵巢癌的发展发展、浸润转移过程中的发生机制及相互作用,探讨两者是否能成为卵巢癌的潜在诊断标志物。材料与方法1.临床资料收集2015年2月至2017年3月在郑州大学第三附属医院住院并行手术切除卵巢组织的患者共104例,其中正常卵巢组织20例,正常卵巢组织来源于因子宫内膜癌、宫颈癌及其他疾病行附件切除术,术后病理确认卵巢未存在病变;卵巢良性上皮性肿瘤组织30例,上皮性卵巢癌组织54例,所有患者均为初发病例,术前均未行任何放、化疗等治疗方案,各标本均经我院病理科医师行病理诊断,均通过受试者同意及伦理委员会批准收集。2.实验方法(1)采取免疫组化SP法检测正常卵巢上皮组织、卵巢良性上皮性肿瘤组织、上皮性卵巢癌组织中Slug和E-cadherin的蛋白阳性表达率,分析2个因子的蛋白阳性表达率与上皮性卵巢癌临床病理特征的关系。(2)采取qRT-PCR法检测正常卵巢上皮组织、卵巢良性上皮性肿瘤组织、上皮性卵巢癌组织中Slug和E-cadherin mRNA的表达水平,分析在上皮性卵巢癌组织中2个因子间mRNA相对表达水平的相关性。3.统计学方法采用SPSS21.0进行统计分析,计数资料以百分率(%)表示,应用χ~2检验比较计数资料间的差异;定量资料用均数±标准差(x±s)表示,采用LSD-t检验比较两组间定量资料的差异,通过单因素方差分析对三组间的定量资料进行比较,采用Pearson相关分析进行相关性分析,检验水准α=0.05,P<0.05有统计学意义,组间两两比较时检验水准α′=α/比较次数=0.0167。结果1.Slug和E-cadherin在不同卵巢组织中的蛋白阳性表达率Slug在正常卵巢组织、卵巢良性上皮性肿瘤组织、上皮性卵巢癌组织中的蛋白阳性表达率分别为5.0%、43.3%和88.9%,两组间比较示:卵巢癌组均超过良性卵巢肿瘤组和正常卵巢组,差异均有统计学意义(P<0.05);良性卵巢肿瘤组超过正常卵巢组,差异有统计学意义(P<0.05)。E-cadherin在正常卵巢组织、卵巢良性上皮性肿瘤组织、上皮性卵巢癌组织中的阳性表达率分别为85.0%、46.7%和22.2%,两组间比较示:卵巢癌组均低于良性卵巢肿瘤组和正常卵巢组,差异均有统计学意义(P<0.05);良性卵巢肿瘤组低于正常卵巢组,差异有统计学意义(P<0.05)。2.Slug和E-cadherin蛋白阳性表达率与上皮性卵巢癌临床病理特征关系上皮性卵巢癌组织中Slug在FIGO I-II期和III-IV期的蛋白阳性表达率分别为75%和97.1%,随着手术病理分期的进展其Slug蛋白阳性表达率增加,差异有统计学意义(P<0.05);伴有淋巴结转移和无淋巴结转移的Slug蛋白阳性表达率分别为100.0%和71.4%,伴有淋巴结转移的Slug蛋白阳性表达率超过无淋巴结转移的卵巢癌患者,差异有统计学意义(P<0.05)。有腹水和无腹水Slug蛋白阳性表达率分别为97.1%和73.7%,有腹水的Slug蛋白阳性表达率超过无腹水的卵巢癌患者,差异有统计学意义(P<0.05),而与患者年龄、组织学类型、组织学级别无关(P>0.05)。上皮性卵巢癌组织中E-cadherin蛋白在FIGO I-II期和III-IV期的阳性表达率分别为40.0%和11.8%,随着手术病理分期的进展其E-cadherin蛋白阳性表达率降低,差异具有统计学意义(P<0.05);有淋巴结转移和无淋巴结转移的E-cadherin的蛋白阳性表达率分别为9.1%和42.9%,有淋巴结转移的E-cadherin的蛋白阳性表达率低于无淋巴结转移的卵巢癌患者,差异有统计学意义(P<0.05)。有腹水和无腹水E-cadherin蛋白阳性表达率分别为11.4%和42.1%,有腹水E-cadherin蛋白阳性表达率低于无腹水者(P<0.05),而与患者年龄、组织学类型、组织学级别无关(P>0.05)。3.不同卵巢组织中Slug和E-cadherin mRNA的表达水平正常卵巢组、卵巢良性上皮性肿瘤组及上皮性卵巢癌组中卵巢组织Slug mRNA的相对表达量分别为0.480±0.279、1.262±0.551和2.346±0.676。上皮性卵巢癌组Slug mRNA表达水平均超过卵巢良性上皮性肿瘤组和正常卵巢组,差异均有统计学意义(P<0.05),卵巢良性上皮性肿瘤组Slug mRNA的表达水平超过正常卵巢组,两组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。三组间Slug mRNA相对表达量比较采用单因素方差分析差异有统计学意义(P<0.05)。正常卵巢组、卵巢良性上皮性肿瘤组及上皮性卵巢癌组中卵巢组织E-cadherin mRNA的相对表达量分别为2.342±0.503、1.139±0.449和0.490±0.315。上皮性卵巢癌组E-cadherin mRNA表达水平均低于卵巢良性上皮性肿瘤组和正常卵巢组,差异均有统计学意义(P<0.05);卵巢良性上皮性肿瘤组E-cadherin mRNA的表达水平低于正常卵巢组,两组间比较差异有统计学意义(P<0.05);三组间E-cadherin m RNA相对表达量比较采用单因素方差分析差异有统计学意义(P<0.05)。4.上皮性卵巢癌组织Slug和E-cadherin mRNA表达水平相关性分析经Pearson相关分析,在上皮性卵巢癌组织中Slug和E-cadherin的mRNA表达水平呈负相关,且有统计学意义(r=-0.276,P<0.05)。结论1.在上皮性卵巢癌组织中Slug蛋白高表达和E-cadherin蛋白低表达,提示两个因子在卵巢癌的发生发展和浸润转移过程中可能发挥重要作用,它们可作为判断卵巢癌恶性程度、生物学行为的参考指标。2.在上皮性卵巢癌组织中Slug和E-cadherin mRNA的表达水平呈负相关,提示Slug和E-cadherin在卵巢癌的发生发展和浸润转移的过程中可能存在相互调节的机制,Slug作为E-cadherin的转录抑制因子,经过抑制E-cadherin的表达从而诱导EMT的产生导致肿瘤的发生和转移。