基因工程HBV/HEV嵌合病毒样颗粒在毕赤酵母中的制备及其特性的初步研究

来源 :中国协和医科大学 中国医学科学院 北京协和医学院 清华大学医学部 | 被引量 : 0次 | 上传用户:longdc
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戊型肝炎病毒(HEV)是引起肠道传播的非甲非乙型急性肝炎的病原体.由于缺少稳定可靠的HEV体外长期培养系统,灭活疫苗和减毒活疫苗的研制受到限制.目前,疫苗研究主要集中于开放读码框架2(ORF2)编码的重组多肽.迄今所发现的唯一的中和表位定于ORF2蛋白的第578和第607氨基酸(aa)之间的区域.该区域对于诱发保护性免疫至关重要.我们分别将HEV ORF2中编码aa551-606和aa578-607的基因片段通过一段柔性的甘氨酸铰链与HBsAg基因的3端相连,构建了2个HBV/HEV融合基因.二者在毕赤酵母细胞内表达的产物分别为分子量约32kDa和29kDa的融合蛋白,均具有组装成HBV/HEV嵌合病毒样颗粒(VLP)的能力.两种嵌合VLP在CsCl密度梯度超离心中的沉降行为和电镜观察的形态学特征与HBsAgVLP相似.ELISA结果显示嵌合VLP可被HBsAg VLP特异性的单克隆抗体高水平识别.因与具有强免疫原性的HBsAgVLP的相似性,嵌合VLP可能赋予其HEV肽段很好的免疫原性.
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