急性缺血性卒中认知障碍、血液流变学与中医证型相关性和Fe3O4纳米酶的神经保护作用研究

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第一部分 急性缺血性卒中认知障碍、血液流变学与中医证型的相关性研究目的:观测急性缺血性卒中不同中医证型认知障碍严重程度及各证型血液流变学相关指标的变化,探讨不同证型间认知障碍的差异及其与血液流变学指标的相关性关系,探索急性缺血性卒中中医辨证分型的客观依据,明确血液流变学与认知障碍的变化与急性缺血性卒中中医辨证分型的关系。方法:临床上收集符合标准的急性缺血性卒中患者120例,分为风痰瘀阻、痰热腑实、气虚血瘀及阴虚风动四个证型。入院后空腹采集肘静脉血,检测血液流变学水平,包括血液粘度、血浆粘度、红细胞聚集指数及红细胞压积等指标。入院14天内完成MMSE及MoCA量表评分,以评估不同证型患者急性缺血性卒中后认知障碍严重程度,并将评估结果与血流变相关指标检测结果进行统计分析,对不同中医证型对应的血流变水平及认知障碍程度进行分析,探讨血液流变学及认知障碍在中医辨证分型中的相关性关系。结果:1.急性缺血性卒中患者血流变水平(包括血液粘度、血浆粘度、红细胞聚集指数及红细胞压积等指标)显著高于健康对照组,其中不同中医证型之间血流变水平比较也具有差异性,其中以风痰瘀阻型表达最高,其次为痰热腑实型、气虚血瘀型,而阴虚风动型水平表达最低。(P<0.05)2.不同证型患者急性缺血性卒中后认知障碍严重程度具有显著性差异,其中,阴虚风动型以轻度为主,气虚血瘀型、痰热腑实型以中度为主,风痰瘀阻型以重度为主。另外,血液流变学水平与认知障碍程度之间的比较也具有显著性差异,认知障碍随着血流变相关指标水平升高而加重。(P<0.05)结论:1.急性缺血性卒中血液流变学水平与中医辨证分型存在相关性。其中,风痰瘀阻型血液流变学水平最高,其次为痰热腑实型、气虚血瘀型,而阴虚风动型水平最低;表明血液流变学可为急性缺血性卒中的中医辨证分型提供一定的客观依据。2.急性缺血性卒中患者认知障碍程度与中医辨证分型存在相关性。其中,阴虚风动型患者认知障碍以轻度为主,气虚血瘀型、痰热腑实型以中度为主,而风痰瘀阻型患者认知障碍以重度为主;说明认知障碍可为急性缺血性卒中的中医辨证分型提供一定的客观依据。综上,本研究明确了急性缺血性卒中中医证型血流变水平及认知障碍之间的关系,为临床利用血液流变学及认知障碍辨证急性缺血性卒中中医分型提供客观依据。第二部分 Fe3O4纳米酶对急性缺血性卒中的神经保护作用及其机制探讨目的:探讨Fe304纳米酶对急性缺血性卒中神经损伤的保护作用及其机制。方法:将实验小鼠随机分为假手术组、给药组(Fe3O4纳米酶15mg/kg和50mg/kg)、MCAO组和MCAO术目前给药组(Fe3O4纳米酶15 mg/kg和50 mg/kg)。采用大脑中动脉闭塞法(MCAO)制备急性缺血性卒中模型。Fe3O4纳米酶0.9%生理盐水稀释配置,Fe3O4纳米酶组于MCAO术前3天开始灌胃给药,1次/天,末次给药30min后行MCAO手术,假手术组则给予相同剂量的生理盐水。利用TTC染色法检测小鼠脑梗死体积;利用免疫组织化学染色法观测缺血侧海马CA1区神经元、星形胶质细胞、血管内皮细胞的变化情况。利用蛋白质印迹法检测缺血侧海马超氧化物歧化酶SOD1、SOD2及血脑屏障相关蛋白ZO-1、Claudin5的表达变化情况。结果:50 mg/kg Fe3O4纳米酶对急性缺血性卒中具有明显的神经保护作用。与MCAO组相比,50 mg/kg Fe3O4纳米酶给药组提高了小鼠脑组织SOD活性并降低MDA的含量,明显减少了急性缺血性卒中后小鼠海马CA1区神经元死亡、抑制了海马CA1区星形胶质细胞的过度激活及维持了海马CA1区血管内皮的完整性。另外,Fe3O4纳米酶提高了海马区紧密连接相关蛋白ZO-1和Claudin-5的表达水平,表明Fe3O4纳米酶通过维持血脑屏障的完整性发挥神经保护作用。结论:50mg/kg Fe3O4纳米酶通过维持血脑屏障的完整性对急性缺血性卒中发挥神经保护作用。
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