明胶基微针介导糖尿病鼠降糖及皮肤创口修复作用研究

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微针(MNs)给药是种新型经皮给药方式,其易于穿透皮肤角质层,进而消除皮肤对经皮给药过程中的阻碍。高分子微针因具有良好的生物相容性和生物降解性,被广泛应用于药物递送领域。本文以天然高分子明胶为研究对象,设计了两种不同的高分子微针经皮给药体系并对其进行系统研究,探究其在经皮给药研究中的应用潜力。具体研究如下:1.设计了一种微针经皮药物缓释递送系统,用于调控Ⅱ型糖尿病血糖。通过酰胺化反应,对明胶大分子链进行修饰改性,制备得到甲基丙烯酸化明胶(GelMA1、GelMA2和GelMA3)。使用傅立叶红外光谱仪和核磁共振氢谱仪,对其结构和接枝率进行分析。采用模板离心浇铸和紫外光固化,将GelMA制备为微针贴片,并借助万能试验机对其进行力学性能测试。对GelMA-MNs进行溶胀实验的探究。实验结果显示,GelMA1-MNs、GelMA2-MNs和GelMA3-MNs刺入琼脂糖20 min后,溶胀率分别达到66.5%、50.8%和45.5%。借助UV-Vis,对负载二甲双胍的GelMA-MNs进行体外药物释放实验,结果显示明胶的接枝率越高,二甲双胍的释放速率越低,并且均未出现二甲双胍爆释现象。体内动物实验结果显示,经GelMA1、GelMA2和GelMA3治疗后,大鼠血糖分别在2.5、3.5和4 h内降至最低血糖值,随后缓慢恢复至高血糖症状,并且接枝率越高,血糖值降低越缓慢。2.以前一部分研究为基础,设计一种柔性GelMA-MNs。制备CaO2@PDA NPs,并借助SEM和TEM对其形貌进行表征,结果显示CaO2@PDA NPs大小均匀,粒径约为200nm。使用XRD和EDS对CaO2@PDA NPs进行定性分析。同时,将其暴露于近红外光(NIR),使用红外热成像仪记录和分析其光热转换性能。此外,以DPPH作为自由基模型,探究CaO2@PDA NPs的抗氧化性能。将CaO2@PDA NPs和PCL/Gel溶液进行静电纺丝,制备得到PCL/Gel-NPs纳米纤维膜。对GelMA-MNs的结构进行设计,将PCL/Gel-NPs作为GelMA-MNs基底,微针针体负载二甲双胍,制备得到柔性GelMA-MNs(GelMA-MNs-D/P)。借助便携式显微放大镜和SEM对GelMA-MNs-D/P的形貌进行表征。使用E.coil和S.aureus两种细菌,采用菌落计数法,评估GelMA-MNs-D/P的光热杀菌性能。此外,将CaO2@PDA NPs和PCL/Gel-NPs分别与L929细胞和3T3细胞进行共培养。采用MTT法,评估GelMA-MNs-D/P经皮给药体系的生物安全性。建立糖尿病伤口模型,进行体内伤口愈合实验并取再生皮肤组织,进行H&E染色、Masson染色和免疫组化分析。实验结果显示,柔性GelMA-MNs经皮给药体系在促进慢性糖尿病伤口愈合领域具有广阔的应用前景,提供了一种协同治疗慢性糖尿病伤口的思路。
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