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目的:探讨萆薢总皂苷对急性痛风性关节炎的防治作用及可能机制,为萆薢总皂苷的临床应用提供实验依据。方法:实验一:72只健康雄性wistar大鼠,随机均分为对照组、模型组、萆薢总皂苷低剂量组(30mg·kg-1)、中剂量组(100mg·kg-1)、高剂量组(300mg·kg-1)和秋水仙碱组(0.3 mg·kg-1),灌胃给药。除正常组外,其余各组大鼠踝关节腔内注射尿酸钠诱导急性痛风性关节炎模型。观察大鼠步态,检测大鼠关节肿胀度,病理学分析踝关节病变部位,ELISA法检测血清炎症因子IL-1β、IL-18、TNF-α表达。Western blot法检测滑膜组织中pro-IL-1 β和NALP3炎性体信号通路相关蛋白变化。实验二:THP-1细胞用佛波酯处理,构建体外巨噬细胞模型,Western blot法检测CD11b的表达。MTT法检测不同浓度TSD和MSU对细胞活力及增殖的影响。将细胞分为control组、MSU组、PBS组、TSD低(0.3μg·ml-1)、中(1μg·ml-1)、高(3μg·ml-1)浓度组、秋水仙碱低(0.5μM)、高(5μM)浓度组,预先用药物处理24h。除control组外,其余各组用MSU处理6h。Western blot法检测NALP3炎性体相关蛋白(NALP3、ASC、pro-caspase-1及效应蛋白caspase-1)的表达,RT-PCR法检测NALP3 mRNA的表达水平,ELISA法检测IL-1β、IL-18、TNF-α的分泌,carboxy-H2DCFDA荧光染色检测线粒体ROS的产生。用NALP3炎性体激活剂Rotenone,并按相同方法处理各组细胞,Western blot法检测NALP3炎性体相关蛋白(NALP3、ASC、caspase-1前体及活性形式)的表达,RT-PCR法检测NALP3mRNA的表达水平。结果:实验一:与正常组相比,模型组大鼠关节肿胀程度明显,活动减少,呈三足跛行步态,滑膜组织有大量炎性细胞浸润,周围软组织充血水肿明显。血清中,IL-1β、IL-18、TNF-α表达明显升高,且滑膜组织NALP3、ASC、caspase1前体及活性形式表达显著上调。与模型组相比,各用药组大鼠步态均明显好转,萆薢总皂苷300、100 mg·kg-1组大鼠关节肿胀度明显降低,关节及周围组织病理学病变好转,滑膜组织NALP3炎性体相关蛋白(NALP3、ASC、pro-caspase-1、caspase-1)表达降低,IL-1β、IL-18、TNF-α分泌显著减少,与阳性对照秋水仙碱组相似。实验二:THP-1细胞用1OOng·ml-1佛波酯处理后,巨噬细胞表面特征蛋白CD11b表达明显上调。TSD在0.1-3μg·ml-1、MSU在0-400μg·ml-1范围内,对细胞增殖和活性无影响。用不同浓度MSU处理THP-1源性巨噬细胞后,测得200-400μg·ml-1范围内IL-1β分泌明显上调。以400μg·ml-1 MSU处理后,NALP3、ASC、pro-caspase-1和caspase-1蛋白表达明显上调,NALP3 mRNA表达增加,IL-1β、IL-18、TNF-α分泌增加。TSD预处理后,可明显降低NALP3炎性体蛋白表达,降低NALP3 mRNA表达,并抑制IL-1β、IL-18、TNF-α的产生和分泌,抑制线粒体活性氧的产生。用rotenone处理THP-1源性巨噬细胞后发现,NALP3炎性体相关蛋白表达明显上调,TSD可抑制NALP3、ASC、caspase-1前体和活性形式的表达,抑制NALP3 mRNA表达。结论:萆薢总皂苷对急性痛风性关节炎具有防治作用,其机制可能为抑制炎性细胞因子的表达,其作用靶点是抑制NALP3炎性体装配和活化。