论文部分内容阅读
Vam3是从中国传统中药山葡萄根中提取得到的白藜芦醇二聚物。虽其在植物体中含量较低,但现已能够用白藜芦醇进行化学合成。有研究发现Vam3具有抗哮喘和抗慢性阻塞性肺疾病(COPD)作用。慢性阻塞性肺疾病(COPD)是一种具有气流受限特征的疾病,与肺部有害气体或有害颗粒的异常炎症有关。WTO有报道预测到2030年COPD将成为全球第三大致死疾病。而相关药理报告显示Vam3可以抑制多种COPD引起的炎症反应及因子,且其抗氧化活性要优于白藜芦醇。虽其药理活性显著,但目前尚无有关Vam3的药代动力学的报道。本文建立了LC-MS/MS分析方法测定Vam3在大鼠体内的生物利用度和组织分布。样品前处理采用乙酸乙酯提取,40℃氮气吹干,甲醇复溶进样；内标选用橙皮素；色谱条件为：Shim-pack XR-ODS C18色谱柱(2.3×75 mm,3 pm),流动相为0.1%甲酸：0.1%甲酸乙腈(50：50,V/V)梯度洗脱。采用电喷雾离子源(ESI),负离子模式,多反应离子检测(MRM)进行扫描,定量离子对为m/z 451.0/345.0 (Vam3)和m/z 301.0/164.0(内标：橙皮素)。Vam3在血浆、心、肝、肾、肺及小肠组织中线性范围为1.64～1000ng/mL,相关系数r>0.99,日内、日间精密度RSD<12.8%,准确度在-10.60～9.08%之间,提取回收率在52.5%～78.2%间,RSD<14.7%。方法快速、灵敏、重现性好。采用所建立的生物样品前处理及LC-MS/MS测定方法,对大鼠血浆、心、肝、肾、肺及小肠组织中的Vam3进行了测定,结果如下：采用DAS软件计算大鼠口服Vam3(70mg/kg)后血浆药时曲线与药动学参数,其Tmax为2.33±0.13 h,Cmax仅有197.33±41.37μg/L,AUC0-t和AUC0-∞分别为565.14±148.20和569.97±150.29 gg/L h,表观分布容积V为269.58±100.84 L/kg。说明Vam3口服后在大鼠体内血药浓度低,在体内分布广泛,绝对生物利用度仅为0.79%。通过对主要脏器中Vam3的测定,发现其在心、肝、小肠、肺、肾等组织中均有较强的穿透能力,可以迅速吸收。在给药2.5 h后,Vam3在各组织中浓度都达到最大值,以小肠最高,肾脏、肝脏次之,随后依次为肺和心,推测其原因可能是小肠是Vam3口服给药后主要的吸收部位,而肝脏和肾脏组织血流量大因此药物分布多。随时间延长各组织中药物的浓度都呈现逐渐降低的趋势,但肺消除速度明显慢于其余组织。采用质谱对Vam3代谢产物进行扫描检测,发现在血浆及各组织中均存在Vamm3的二相代谢产物葡萄糖醛酸结合物,因此推断Vam3在体内可通过二相代谢反应进行代谢。本实验对Vam3进行了早期药代动力学研究,测定了Vam3在大鼠体内的生物利用度及组织分布,阐明其体内药动学特征,为评估Vam3的成药性提供了科学依据,并为接下来的结构改造与剂型设计提供了重要参考和研究思路。