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目的: 确定大鼠远位触液神经元drebrin的表达,观察CCI术后10天远位触液神经元drebrin的表达变化,并探讨免疫荧光技术用于研究远位触液神经元的可能性。
材料与方法: 将雄性SD大鼠随机分为空白对照组、假手术组和CCⅠ组,术后第8天采用CB-HRP示踪标记远位触液神经元,术后第10天观察大鼠行为变化,测定MWT和TWL,并应用免疫荧光双标和激光共焦显微技术观察、比较远位触液神经元上drebrin的表达变化。
结果:
1.在脑干的特定部位恒定出现CB-HRP红色荧光标记的两个神经细胞簇,B群对称分布于腹侧PAG至第四脑室底,A群位于中脑导水管腹侧中线。
2.空白对照组与假手术组大鼠步态正常,MWT值及TWL值与术前比较无明显变化(P>0.05),两组之间相比无差异(P>0.05);CCⅠ组大鼠出现术侧下肢行走无力,步态呈轻微跛行,术后痛阈明显低于对照组及假手术组(P<0.05)。
3.各组均见CB-HRP阳性标记细胞,三组间CB-HRP细胞记数比较无显著差异(P>0.05);空白对照组和假手术组仅见CB-HRP阳性细胞,未见drebrin阳性细胞。CCⅠ组大鼠PAG腹侧至第四脑室底的脑区左右两侧均见CB-HRP/drebrin双标阳性细胞,CB-HRP/drebrin双标阳性细胞占CB-HRP阳性细胞的70.5%,与空白对照组和假手术组比较差异显著(P<0.05)。
结论: 大鼠远位触液神经元上存在drebrin,在CCI神经病理性疼痛条件下drebrin在胞浆内的表达增加,提示远位触液神经元参与了神经病理性疼痛的信息传递。
本实验中荧光显色清晰可靠,可将免疫荧光技术用于远位触液神经元的研究。