玻璃体切除术后晶状体上皮细胞的变化及茶多酚眼用凝胶干预作用的实验研究

被引量 : 0次 | 上传用户:wzs
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:观察玻璃体切除术后微环境的改变对兔晶状体上皮细胞线粒体活性氧、膜电位、内质网及Caspases-3表达的影响及茶多酚眼用凝胶干预后的变化,研究玻璃体腔微环境的改变对兔晶状体上皮细胞的影响及茶多酚眼用凝胶的干预作用,阐明玻璃体切除术后并发性白内障的发病机制及茶多酚眼用凝胶的效果。方法:1.体外培养兔晶状体上皮细胞(Rabbit lens epithelial cells,RLECs),分别采用BSS、硅油、O2、C3F8制成特殊用途选择培养基,模拟体内玻璃体切除术后条件,加入不同浓度的茶多酚眼用凝胶进行干预,观察玻璃体腔微环境的改变对兔晶状体上皮细胞形态的变化。2.配制含终浓度分别为1000μg/ml、100μg/ml、10μg/ml、1μg/ml、0μg/ml茶多酚眼用凝胶的培养基体外培养兔晶状体上皮细胞,通过CCK-8法筛选出适合细胞生长的茶多酚眼用凝胶的安全浓度。3.实验分为四组:A组(正常RLECs)-正常组,B组(RLECs+BSS、硅油、O2、C3F8)-对照组,C组(RLECs+BSS、硅油、O2、C3F8+10μg/ml茶多酚眼用凝胶),D组(RLECs+BSS、硅油、O2、C3F8+100μg/ml茶多酚眼用凝胶)。4.通过流式细胞仪检测线粒体活性氧、膜电位的情况,免疫荧光化学检测内质网的表达情况及免疫组化检测凋亡相关蛋白Caspases-3蛋白表达变化,进而研究玻璃体切除术后并发性白内障的发病机制及茶多酚眼用凝胶的效果。结果:1.倒置相差显微镜下见:体外培养的兔晶状体上皮细胞呈梭形或多边形,单层贴壁生长,细胞边界清楚。2. CCK-8法检测显示:(1)加入终浓度为1000μg/ml的茶多酚眼用凝胶组OD值明显低于单纯晶状体上皮细胞组,差异有统计学意义(P<0.05);(2)加入终浓度分别为100μg/ml、10μg/ml、1μg/ml的茶多酚眼用凝胶组与单纯晶状体上皮细胞组OD值未见明显差异,无统计学意义(P<0.05)。3.在BSS、硅油、O2、C3F8损伤模型建立后,倒置相差显微镜下观察AD组细胞见:A组细胞呈梭形或多边形,单层贴壁生长,细胞边界清楚。B组一些细胞体积缩小、变圆,折光性改变,细胞周围见透亮圈;细胞核缩小,分裂为多个或出现核边聚;培养液中出现圆形悬浮细胞及细胞碎片。CD组细胞呈梭形或多边形,单层贴壁生长,细胞边界清楚,少许细胞体积缩小、变圆,折光性改变,培养液中未出现圆形悬浮细胞及细胞碎片。4.在BSS、硅油、O2、C3F8培养条件下的上皮细胞线粒体活性氧产生增多,而应用茶多酚眼用凝胶干预组活性氧的产生明显减少。5.在BSS、硅油、O2、C3F8培养条件下的上皮细胞线粒体膜电位降低;而茶多酚眼用凝胶干预组细胞线粒体膜电位升高。6.经免疫荧光检测,在BSS、硅油、O2、C3F8培养条件下晶状体上皮细胞中内质网的阳性率明显降低,而应用茶多酚眼用凝胶干预后内质网的阳性率明显升高。7.经免疫组化检测,在BSS、硅油、O2、C3F8培养条件下晶状体上皮细胞中Caspases-3表达明显,而应用茶多酚眼用凝胶干预后Caspases-3表达明显降低。结论:玻璃体切除术后微环境的改变引发晶状体上皮细胞的凋亡,上皮细胞的凋亡是玻切术后并发性白内障发生的原因之一,而茶多酚眼用凝胶能够有效抑制上皮细胞线粒体活性氧水平,保护线粒体膜电位及内质网的功能,降低细胞凋亡过程中最重要的终末执行酶Caspases-3表达水平,从而抑制晶状体上皮细胞凋亡。保护晶状体上皮细胞免受损害,维持其结构和功能的正常,从而可能延缓玻切术后并发性白内障的发生。
其他文献
背景:叶酸在胚胎发育过程中起重要作用,心血管系统的正常发育也与机体叶酸水平密切相关。参与叶酸代谢的酶和载体蛋白对机体正常叶酸水平的维持至关重要。编码这些蛋白基因的
<正>1引言随着云计算时代的到来,各种类型的互联网应用层出不穷,对与此相关的数据模型、分布式架构、数据存储等数据库相关的技术指标也提出了新的要求。虽然传统的关系型数
文章运用文献资料、问卷调查、数理统计等研究方法,对长沙市大众跆拳道馆的现状进行分析,并提出合理化建议,以期推动长沙市大众跆拳道的进一步普及和发展。
美国好莱坞是驰名世界的电影城。它不但是影视演员向往的圣地、朝拜的殿堂,同时也是许多美国本土居民以及到美国游览的外国旅客都极想参观游览的地方。1911年开设的好莱坞,
不同年龄阶段的教师表现出各自不同的人格特点,青年教师富有活力、热情、虚心好学,但偏激冲动;中年教师稳定成熟、自信、自制力强;老年教师经验丰富、思想深刻,但心力退化。
磨损是影响机械设备工作可靠性以及使用寿命的主要因素之一,因磨损产生的金属磨粒在机械设备运转时悬浮在润滑油中并随之循环流动。因此润滑油中的金属颗粒反应了机械设备由
目的:探讨分时段人性化保护性约束对CCU预防留置胃管患者非计划性拔管的效果。方法:回顾性分析我院CCU2011年9月~2013年4月,留置胃管者40例,随机分成两组(观察组与对照组),观
风源系统是城市轨道交通列车的主要组成部分,为列车的制动、减速、刹车等提供洁净的压缩空气。为了列车启动、刹车时的时间、速度能够控制的更加精确,并减少设备的故障发生,风源
我国民事诉讼法中规定了七类证据,其中就包括当事人陈述,但是在实际应用中,由于当事人自身的特点以及外部应用环境的局限,导致当事人陈述的证据地位并没有得到足够的重视,甚