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目的:检测ADD1在胃癌组织中的表达水平,探讨在胃癌组织中ADD1的表达水平与Hedgehog信号通路之间的关系,为进一步明确胃癌的发生发展机制提供新的思路。方法:收集承德医学院附属医院2013年9月至2015年6月手术切除的胃癌组织及相对应的正常胃组织各60例,这些收集来的标本都已经过术后病理确认,证实为胃腺癌,且所有案例在手术前均未有放疗及化疗行为。本实验中应用了蛋白印迹(Western Blot)和免疫组化(IHC)方法来检测胃癌组织及相对应的正常胃组织中ADD1、IHH、PTCH1、GLI1四者蛋白的表达情况,应用荧光定量PCR(q Real-time PCR,q RT-PCR)实验方法检测胃癌组织及相对应的正常胃组织中ADD1、IHH、PTCH1、GLI1四者m RNA的表达情况,所得到的实验数据用以结合临床资料来进行统计学分析,以P<0.05为差异有统计学意义。结果:1.蛋白印迹(Western Blot)实验结果1.1ADD1、IHH、PTCH1、GLI1蛋白在胃癌组织和正常胃组织中的表达情况ADD1、IHH、PTCH1、GLI1蛋白在胃癌组织中的相对表达量均高于相对应的正常胃组织(P<0.05)。1.2胃癌组织中ADD1、IHH、PTCH1、GLI1蛋白的表达情况与各项临床病理特征之间的关系胃癌组织中ADD1、IHH、PTCH1、GLI1四者蛋白的表达均与患者的年龄、性别等因素无明显相关关系(P>0.05)。ADD1、IHH、PTCH1、GLI1蛋白在低分化的胃癌组织中的表达水平均高于高中分化的胃癌组织(P<0.05)。TNM分期为Ⅰ&Ⅱ期的胃癌组织中ADD1、IHH、PTCH1、GLI1蛋白表达水平低于TNM分期为Ⅲ&Ⅳ期的胃癌组织(P<0.05)。伴有浆膜浸润的胃癌组织中ADD1、IHH、PTCH1、GLI1蛋白的相对表达量高于浸润深度未达到浆膜的胃癌组织(P<0.05)。伴有淋巴结转移的胃癌组织中ADD1、IHH、PTCH1、GLI1蛋白的相对表达量高于淋巴结未转移的胃癌组织(P<0.05)。2.免疫组化(IHC)实验结果2.1 ADD1、IHH、PTCH1、GLI1蛋白在胃癌组织及正常胃组织中的表达情况ADD1、IHH、PTCH1、GLI1蛋白在胃癌组织中的表达量明显高于正常胃组织(P<0.05)。2.2胃癌组织中ADD1、IHH、PTCH1、GLI1蛋白表达情况与各项临床病理特征之间的关系胃癌组织中ADD1、IHH、PTCH1、GLI1蛋白的表达情况均与患者的年龄、性别等因素无明显相关关系(P>0.05)。ADD1、IHH、PTCH1、GLI1蛋白的阳性表达率在低分化的胃癌组织中高于高中分化的胃癌组织(P<0.05)。TNM分期为Ⅰ&Ⅱ期的胃癌组织中ADD1、IHH、PTCH1、GLI1蛋白的阳性表达率低于TNM分期为Ⅲ&Ⅳ期的胃癌组织(P<0.05)。伴有浆膜浸润的胃癌组织中ADD1、IHH、PTCH1、GLI1蛋白的阳性表达率高于浸润深度未达到浆膜的胃癌组织(P<0.05)。伴有淋巴结转移的胃癌组织中ADD1、IHH、PTCH1、GLI1蛋白的阳性表达率高于淋巴结未转移的胃癌组织(P<0.05)。3.实时荧光定量(QReal-Time PCR)实验结果3.1 ADD1、IHH、PTCH1、GLI1m RNA在胃癌组织及正常胃组织中的表达情况胃癌组织中ADD1、IHH、PTCH1、GLI1m RNA的表达水平均高于正常胃组织(P<0.05)。3.2胃癌组织中ADD1、IHH、PTCH1、GLI1mRNA的表达水平与各项临床病理特征之间的关系胃癌组织中ADD1、IHH、PTCH1、GLI1m RNA的表达情况均与患者的年龄、性别等因素无明显相关关系(P>0.05)。低分化的胃癌组织中ADD1、IHH、PTCH1、GLI1m RNA的表达水平高于高中分化的胃癌组织(P<0.05)。TNM分期为Ⅰ&Ⅱ期的胃癌组织中ADD1、IHH、PTCH1、GLI1m RNA的表达水平低于TNM分期为Ⅲ&Ⅳ期的胃癌组织(P<0.05)。伴有浆膜浸润的胃癌组织中ADD1、IHH、PTCH1、GLI1m RNA的表达水平高于浸润深度未达到浆膜的胃癌组织(P<0.05)。伴有淋巴结转移的胃癌组织中ADD1、IHH、PTCH1、GLI1m RNA的表达水平高于淋巴结未转移的胃癌组织(P<0.05)。4.胃癌组织中ADD1、IHH、PTCH1、GLI1的相关关系Western Blotting实验中ADD1蛋白的相对表达量与IHH蛋白的相对表达量呈正相关关系(r=0.611,P<0.05);ADD1蛋白的相对表达量与PTCH1蛋白的相对表达量呈正相关关系(r=0.681,P<0.05);ADD1蛋白的相对表达量与GLI1蛋白的相对表达量呈正相关关系(r=0.759,P<0.05)。免疫组织化学实验中ADD1蛋白的相对表达量与IHH蛋白的相对表达量呈正相关关系(r=0.532,P<0.05);ADD1蛋白的相对表达量与PTCH1蛋白的相对表达量呈正相关关系(r=0.731,P<0.05);ADD1蛋白的相对表达量与GLI1蛋白的相对表达量呈正相关关系(r=0.852,P<0.05)。QReal Time-PCR实验中ADD1m RNA的相对表达量与IHHm RNA的相对表达量呈正相关关系(r=0.675,P<0.05);ADD1m RNA的相对表达量与PTCH1m RNA的相对表达量呈正相关关系(r=0.811,P<0.05);ADD1m RNA的相对表达量与GLI1m RNA的相对表达量呈正相关关系(r=0.719,P<0.05)。结论:1.ADD1在胃癌组织中的表达水平高于正常胃组织,在低分化的胃癌组织中高于高中分化的胃癌组织,提示ADD1与胃癌的发生发展有着密切的关系。2.ADD1的表达水平在侵及浆膜和有淋巴结转移的胃癌组织中高于未侵及浆膜和无淋巴结转移的胃癌组织,提示ADD1的高表达与胃癌细胞的浸润和转移有关。3.ADD1的表达水平与Hedgehog信号通路组件IHH、PTCH1、GLI1的表达水平呈正相关关系,提示ADD1与Hedgehog信号通路在胃癌的发生发展过程中有着密切关系。